利用金属离子促进枯草芽孢杆菌芽孢形成的方法

摘要

本发明是一种利用金属离子促进枯草芽孢杆菌芽孢形成的方法，包括步骤：1）制作培养基其中加入0.009-0.02%的MnSO₄，制备平板，在4℃保存备用；2）将枯草芽孢杆菌菌株保存在所述培养基中，"之"字形划平板，37℃下培养过夜；3）将过夜后的枯草芽孢杆菌菌株进行活化，4）将经过活化的枯草芽孢杆菌的种子液接种至豆粕或棉籽中进行固态发酵；5）将发酵产物进行烘干至水分≤10-13%、粉碎，即得到富含活性肽蛋白饲料。本发明的方法缩短了发酵周期。对发酵生产枯草芽孢杆菌的条件进行了优化，对发酵温度、pH值、转速以及装液量进行了条件优化，得到了效果最佳的发酵条件，可以显著提高发酵生物量的效果，适用于大规模的发酵生产。

主权项

一种利用金属离子促进枯草芽孢杆菌芽孢形成的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：1）使用0.4‑0.6%的玉米淀粉，1.8‑2.2%的玉米面，3%的蔗糖，1‑1.4%的豆芽汁，0.075%的MgSO₄，0.25%的KH₂PO₄，0.8%的CaCO₃，0.009‑0.02%的MnSO₄，余量为蒸溜水制作培养基，经120‑125℃高压灭菌20min，制备平板；每块平板倒入15‑20mL超净台中冷却凝固后，加盖板，封口，在4℃保存备用；2）将购买得到的枯草芽孢杆菌菌株保存在所述培养基中，置于室温下的超净台中，用经高压灭菌过的牙签蘸取培养基，然后"之"字形划平板，37℃下培养过夜； 3）将过夜后的枯草芽孢杆菌菌株接种于所述培养基中进行活化，其中，枯草芽孢杆菌菌株与与培养基之比为1：25，放置于发酵罐中，发酵罐摇瓶发酵，发酵温度35‑37℃，pH值7.0‑7.2，转速180‑220r/min，通气培养24h；4）将经过活化的枯草芽孢杆菌的种子液接种至豆粕或棉籽中进行固态发酵，接种量OD₆₀₀为豆粕或棉籽重量的8～12%；接种时进行充分搅拌，发酵过程中监测温度变化，温度高于50℃时，进行翻料处理，发酵时间为48h；5）将发酵产物进行烘干至水分≤10‑13%、粉碎，粉碎细度45～55目，即得到富含活性肽蛋白饲料。