发明名称 TAT-IL-24-KDEL融合蛋白及其制备方法和应用
摘要 一种TAT-IL-24-KDEL融合蛋白,是指TAT穿膜肽和内质网定位信号肽KDEL分别连接在白细胞介素-24(IL-24)的N端和C端的融合蛋白。其制备步骤包括:PCR扩增获取TAT-IL-24-KDEL编码基因,利用pET28-SUMO作为载体,转化BL21(DE3),异源表达带有SUMO标签的TAT-IL-24-KDEL融合蛋白。由于融合蛋白以包涵体形式表达,经过变复性、镍柱纯化和标签去除操作后获得高纯度的TAT-IL-24-KDEL融合蛋白。利用流式细胞实验检测纯化的TAT-IL-24-KDEL融合蛋白对乳腺癌MCF-7细胞的促凋亡作用,利用免疫荧光实验检测融合蛋白在胞内的定位情况。本发明首次制备了TAT-IL-24-KDEL融合蛋白,纯度达到92%,能够有效定位于内质网上从而促进乳腺癌细胞MCF-7的凋亡。
申请公布号 CN103755814A 申请公布日期 2014.04.30
申请号 CN201410016426.6 申请日期 2014.01.14
申请人 华东理工大学 发明人 孙爱友;魏东芝;张舰;王晓娟;白超刚;徐瑞;董玉国;张星
分类号 C07K19/00(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;A61K38/20(2006.01)I;A61K47/48(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I 主分类号 C07K19/00(2006.01)I
代理机构 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 代理人 杨元焱
主权项 一种TAT‑IL‑24‑KDEL融合蛋白,其特征在于:将TAT穿膜肽和内质网定位信号肽KDEL分别融合到IL‑24蛋白的N端和C端,构成TAT‑IL‑24‑KDEL融合蛋白;所述TAT穿膜肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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