一种吲哚方酸菁染料及其制备方法

摘要

本发明提供一种吲哚方酸菁染料，所述吲哚方酸菁染料的结构通式为：其中，X为Br、Cl和I的任一种；R为以下结构的任一种：、、、、。本发明提供的吲哚方酸菁染料稳定性好，吸收强度大，可应用于五分类血球仪的配套试剂中，作为有核红细胞的染料，也可以应用于荧光标记等其它生命科学研究领域。

主权项

1.一种吲哚方酸菁染料的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：第一步：干燥洁净的三颈烧瓶中，加入苯肼10.6g，3-甲基-2-丁酮8.6g，通入氮气并避光，常温下搅拌24h；在这个过程中向反应体系中通入氮气并避光，以此保护反应体系并防止产物见光分解；反应结束后用乙醚萃取所得产物，然后向萃取液加入无水硫酸镁，摇匀后静置24h以吸水干燥；然后过滤，滤液用旋转蒸发仪除去乙醚，得到黄色油状物，即中间体Ⅰ；第二步：干燥洁净的三颈烧瓶中，加入中间体Ⅰ10g，醋酸60mL，并向反应体系中通入氮气以保护反应体系；升温至120℃回流搅拌8h，冷却到室温后，向反应体系中滴加质量分数为30%的Na₂CO₃水溶液至反应体系的pH值为中性；用乙醚萃取反应产物，取有机相，并向其中加入无水硫酸镁干燥24h，过滤，用旋转蒸发仪旋转蒸发滤液以除去乙醚，得到除去乙醚的滤液，减压蒸馏所述除去乙醚的滤液，收集负压-0.09kPa时140℃的馏分，得到中间体Ⅱ，产品的产率为65%；第三步：干燥洁净的三颈烧瓶中，加入中间体Ⅱ8 g，烯丙基溴8 g和苯乙醇20mL，并通入氮气以保护反应体系；加热至70℃回流并搅拌6h，待反应体系冷却后向其中加入100mL石油醚，继续搅拌1h；静置反应体系，倾去上层溶液，得到黑色油状物，即中间体Ⅲ；第四步：干燥洁净的三颈烧瓶中，加入中间体Ⅲ 5g，方酸0.57g，吡啶5mL，体积比为1：1的甲苯一正丁醇混合溶液10mL，并通入氮气以保护反应体系；加热至110℃回流搅拌6h；待反应体系冷却至室温，用旋转蒸发仪旋转蒸发浓缩反应液，向所得浓缩液加入异丙醇20mL，搅拌均匀后静置，过滤，得金黄色固体粗产物；用柱层析硅胶纯化，以二氯甲烷：甲醇体积比为100:1的洗脱液洗脱除去前端杂质，再用二氯甲烷：甲醇体积比为8:1的洗脱液洗脱出产物，将所述产物置于真空干燥箱中以40-45℃的温度干燥24h，得到金黄色的固体产品，即吲哚方酸菁染料，收率为54.3%，最后将合成的吲哚方酸菁染料密封保存。