食品和饲料中貉成分快速检测试剂盒的制备和检测方法

摘要

本发明公开了一种食品和饲料中貉成分快速检测试剂盒的制备和检测方法，属于食品和饲料中动物源性成分的定性检测技术，具体地说是用实时荧光PCR技术检测食品和饲料中貉成分的试剂盒及方法。试剂盒包括2×PCRMasterMix、上游引物、下游引物、Taqman探针；其中2×PCRMasterMix中含有TaqDNA聚合酶、反应缓冲液、氯化镁、dNTP；貉成分的快速检测方法包括食品和饲料DNA的提取、貉成分的实时荧光PCR扩增和结果判定。本发明的优点是快速、特异性强、操作简便、重复性好，该方法灵敏度很高，可检测含量低至0.00001%的貉成分。

主权项

一种貉成分快速检测试剂盒，其特征在于其中的试剂包括（1）－（4）：（1）2×PCR Master Mix    包括0.05 u/µL Taq DNA 聚合酶，反应缓冲液，4 mmol/L 氯化镁，0.4 mmol/L dNTP (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)；其中反应缓冲液含有20 mmol /L pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷－盐酸、100 mmol/L氯化钾和2％曲拉通X－100；（2）上游引物：10 µmol/L，序列为：5'‑ AATCTTGCCTGGGTTTGGAA ‑3'；（3）下游引物：10 µmol/L，序列为：5'‑ CAGTAAATATGTGGTGGGCTCACA ‑3'；（4）Taqman‑MGB探针：10 µmol/L，序列为：5'‑ CATACTACTCCGGGAAAA ‑3'。