一种对衣藻叶绿体表达载体进行构建的方法

摘要

本发明公开了一种对衣藻叶绿体表达载体进行构建的方法。步骤如下：首先选取目标质粒，并以其为模版，用引物进行扩增psbA;在95摄氏度环境下进行变性，时间至少5分钟；随后，92-93摄氏度的环境下，变性1分钟；反复上述步骤3次；然后退火，时间至少2分钟，75摄氏度延伸至少一分钟；PCR产物经电泳检测；切胶回收目的条带；将回收的片段进行TA克隆，构件质粒；上述步骤循环3次即可；阳性菌落需要经过PCR和双酶切鉴定，选取鉴定正确的菌液留用；DNA连接酶连接回收的片段，需要在15摄氏度的环境下转化到感受态细胞中，并且在琼脂平板上培养过夜。本发明的有益效果是，成本较低、重复性好，与预期相符，说明质粒构建的合理性和成果性。

主权项

一种对衣藻叶绿体表达载体进行构建的方法，其特征在于，步骤如下：首先选取目标质粒，并以其为模版，用引物进行扩增psbA;在95摄氏度环境下进行变性，时间至少5分钟；随后，92‑93摄氏度的环境下，变性1分钟；反复上述步骤3次；然后退火，时间至少2分钟，75摄氏度延伸至少一分钟；PCR产物经电泳检测；切胶回收目的条带；将回收的片段进行TA克隆，构件质粒；上述步骤循环3次即可。