一种同时鉴别食品中猪牛羊鸡四种成分的试剂盒及应用

摘要

本发明属于食品质量安全检测技术领域，具体涉及一种同时鉴别食品中猪牛羊鸡四种成分的试剂盒及应用。针对深加工食品中严重降解的总DNA，首先使用包含通用引物SIM1和SIM2的预混液进行第一轮扩增，将扩增产物作为第二轮扩增的模板；再使用包含通用引物SIM1和5种物种特异性引物P、C、B、M的预混液对此模板进行第二轮多重PCR扩增，电泳检测第二轮扩增产物，根据电泳条带的分子量大小，同时对食品中猪、牛、羊、鸡4种肉类成分进行鉴别。经验证，本试剂盒通过使用半巢式-多重PCR技术，在保证检测特异性的前提下，极大地提高了现有以PCR技术为基础的食品物种检测方法的检测灵敏度，本试剂盒可用于深加工食品中肉类种属的筛选和肉类掺假的检测和监管。

主权项

一种基于半巢式‑多重PCR的同时鉴别食品中猪、牛、羊、鸡四种肉类成分的试剂盒，其特征是由以下试剂构成：（1）预混液1：其中包含引物SIM10.4μM，序列为CCCATCAAACATCTCATCTTGATGAAA，引物SIM20.4μM，序列为AAGTGGAAGGCGAAGAATCG，Taq酶1.25U，dNTP各0.2μM，PH8.5的Tris‑HCl10mM，KCl50mM，MgCl21.5mM,预混液1储藏条件为4℃，保质期半年；（2）预混液2：其中包含引物SIM10.4μM，引物P0.4μM，序列为GCTGATAGTAGATTTGTGATGACCGTA，引物C0.4μM，序列为AAGATACAGATGAAGAAGAATGAGGCG，引物B0.4μM，序列为CTAGAAAAGTGTAAGACCCGTAATATA，引物M0.4μM，序列为GCCTATGAATGCTGTGGCTATTGTCGC，Taq酶1.25U，dNTP各0.2μM，PH8.5的Tris‑HCl10mM，KCl50mM，MgCl21.5mM，溴酚蓝5%,预混液2储藏条件为4℃，保质期半年。