发明名称 |
一种AFP重组蛋白和体外高效重组表达的方法 |
摘要 |
本发明涉及AFP重组蛋白和体外高效重组表达的方法,具体涉及一种人工信号肽-AFP-609aa-6his的重组蛋白和哺乳动物瞬时表达系统体外高效重组表达方法,其DNA序列如SEQ ID NO:1所示,a.优化AFP重组蛋白DNA序列,b.将重组蛋白基因通过双酶切克隆到pcDNA3.1+载体中,构建pcDNA3.1+-AFP表达质粒,并进行质粒抽提,c.将抽提得到的pcDNA3.1+-AFP质粒用PEI转染进CHO-S悬浮细胞进行重组蛋白的表达,d.7天后分离纯化得到的重组蛋白。本发明通过大规模瞬时悬浮CHO-S表达系统制备的人工合成带有6HIS标签的AFP蛋白活性跟天然AFP蛋白相近,且得到的纯度较高,内毒素含量低,无动物源性蛋白的污染,可以有望作为肝癌免疫治疗的肿瘤抗原疫苗。 |
申请公布号 |
CN103755811A |
申请公布日期 |
2014.04.30 |
申请号 |
CN201310683033.6 |
申请日期 |
2013.12.13 |
申请人 |
上海柯莱逊生物技术有限公司 |
发明人 |
陆玲玲;钱妮;苏国新;叶永清 |
分类号 |
C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;A61K39/00(2006.01)I;A61K47/48(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61P1/16(2006.01)I |
主分类号 |
C07K19/00(2006.01)I |
代理机构 |
上海三方专利事务所 31127 |
代理人 |
吴干权;钱品兴 |
主权项 |
一种人工信号肽‑AFP‑609aa‑6his的重组蛋白,其特征在于其DNA序列如SEQ ID NO:1所示。 |
地址 |
201201 上海市浦东新区张江高科技产业东区瑞庆路528号20幢乙号4、5层 |