一种快速高效获得加拿大红枫愈伤组织的方法

摘要

本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种快速高效获得加拿大红枫愈伤组织的方法。包括选材、消毒、接种和培养四个步骤，本发明通过取材前对植株进行夜间温度为25-35℃，白天温度为40-43℃的环境下处理10-15天，然后进行取样接种，大大降低了污染率，污染率仅为0-1.5%，并且防止了愈伤组织褐化、玻璃化的发生，且本发明从选材到诱导出愈伤组织只需要18-25天即可，大大提高工作效率。本发明在诱导愈伤组织时，不仅省去了无菌系的建立过程，直接从大田植株上取材去诱导愈伤组织，且诱导出的愈伤组织生长质量好，诱导率高。通过放在本发明的培养基中进行培养，促进了加拿大红枫茎尖、茎段和叶片愈伤组织的诱导。

主权项

一种快速高效获得加拿大红枫愈伤组织的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、选材：选取健康的加拿大红枫，将其置于夜间温度为25‑35℃，白天温度为40‑43℃的环境下进行处理，10‑15天后，从茎尖顶端向下切取长度为5‑10cm的材料，并用自来水冲洗25‑30min后，备用；步骤二、消毒：将步骤一切取的材料浸入质量百分比浓度为75%的酒精中消毒2‑3s，之后用质量百分比浓度为0.15%的升汞消毒8‑10min，再用蒸馏水冲洗3‑4次后放到灭过菌的滤纸上，备用；步骤三、接种：用灭过菌的剪刀或刀片将步骤二处理过的材料分成茎尖、茎段和叶片三部分，再将茎尖切割成长度为0.2‑0.5cm，茎段切割成长度为0.4‑0.5cm，将叶片切割成大小为1‑1.5cm²，之后将茎尖、茎段和叶片分别接入相同的培养基中进行培养，且茎尖和茎段长度的1/3‑1/2没入培养基中，叶片背面紧贴培养基表面；步骤四、培养：将接种后的培养基放入组培架中进行培养，8‑10天后长出愈伤组织，20‑25天后转接继代一次，所述组培架中的光照强度为3000‑4000 Lx，温度为24‑26℃。