一种体外扩增NK细胞的方法

摘要

本发明涉及一种NK细胞的培养扩增方法，具体为一种用自体外周血单个核细胞在体外培养大量扩增NK细胞的方法，该方法利用不同的细胞因子组合达到增殖和活化NK细胞的目的。具体为将自体外周血单个核细胞接种在抗CD3、CD16抗体预包被的培养瓶中刺激16～24h，加入含IL-2和IL-18的无血清培养液培养。本发明将抗CD3、CD16抗体包被固化，直接刺激活化NK细胞，显著提高了NK细胞的杀伤毒性，仅通过IL-2和IL-18两种细胞因子就实现了对NK细胞的激活和扩增，既保证了NK细胞的扩增倍数和细胞毒性，又大大降低了NK细胞的培养成本。

主权项

一种体外扩增NK细胞的方法，其特征在于由以下步骤构成：a.将浓度为0.01～5.0mg/ml的CD3单克隆抗体、0.01～5.0mg/ml的CD16单克隆抗体包被在细胞培养瓶中，包被条件为室温，孵育时间为0.5～12h；b.将从外周血中分离获得的单个核细胞用无血清培养液接种在上述的细胞培养瓶中，刺激2～24h；c.加入NK细胞培养用无血清培养液和浓度为15～50ng/ml的白细胞介素‑2以及15～50ng/ml的白细胞介素‑18，刺激12～72h，然后转入细胞培养袋中继续培养；d.收获NK细胞。