禾谷类作物籽粒中β-葡聚糖含量的测定方法

摘要

本发明提供一种禾谷类作物籽粒中β-葡聚糖含量的测定方法，其中采用的酶测定方法具有与标准方法一致的准确度和专一性，种子用量少，且使用廉价易得的酶，适用于珍稀种质资源小批量多批次长期、连续测定的工业生产的需要。

主权项

禾谷类作物籽粒中β‑葡聚糖含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：1）从纤维酶中纯化葡聚糖酶；2）样品溶液的配制：籽粒晒干粉碎，将粉末样品用酒精润湿，加入NaOH溶液混匀后放置14‑16h，然后调pH值呈中性，离心后取上清，即得样品溶液；3）葡萄糖标准液的配制；4）葡萄糖转化：向上述样品溶液中加入琥珀酸钠缓冲液和步骤1）中纯化的葡聚糖酶，于35‑40℃水浴中保温2‑3h；5）显色测定及标准曲线的绘制：向步骤3）的葡萄糖标准液中依次加入醋酸钠缓冲液、琥珀酸钠缓冲液和GOPOD显色液，于35‑40℃水浴中保温35‑45min，然后置于暗处10‑15min，在510nm测吸光度值，绘制标准曲线；6）样品显色测定及β‑葡聚糖含量的计算：采用与步骤5）相同的方法，对步骤4）中所得溶液进行显色测定，根据测定的吸光度值对应于标准曲线上葡萄糖的含量，代入以下计算公式，即得β‑葡聚糖的含量：β‑葡聚糖含量(%)=C×50×2.5×100×0.9/(W×1000)=C×11.25/W其中，C为样品对应的葡萄糖的含量，W为粉末样品重量，0.9为葡萄糖转化成葡萄糖苷的转换因子。