发明名称 |
聚乙二醇修饰的人血白蛋白及其制备方法 |
摘要 |
本发明涉及生物医药技术领域,特别是聚乙二醇修饰的人血白蛋白及其制备方法。所述聚乙二醇修饰的人血白蛋白,由白蛋白分子上的34位半胱氨酸残基的巯基、N-末端氨基或自由氨基结合聚乙二醇构成。其中定点单修饰所采用的修饰剂分别是聚乙二醇-马来酰亚胺和聚乙二醇-丙醛,自由氨基随机修饰所采用的修饰剂聚乙二醇-琥珀酰亚胺活性酯或氰尿酰氯活化的单甲氧基聚乙二醇,结合聚乙二醇的白蛋白分子上的自由氨基的修饰率是3%-78%。本发明制得的聚乙二醇修饰的人血白蛋白与天然白蛋白相比,具有半衰期延长,血浆清除减慢等优良特性,有利于减少用药频率,缓解白蛋白来源紧张问题。 |
申请公布号 |
CN101709085B |
申请公布日期 |
2014.04.23 |
申请号 |
CN200910229546.3 |
申请日期 |
2009.11.02 |
申请人 |
山东泰邦生物制品有限公司;山东大学药学院 |
发明人 |
王凤山;庞广礼;赵婷;谭海宁;仲立军;刘纯慧;马山;刘欣晏 |
分类号 |
C07K14/765(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K1/107(2006.01)I |
主分类号 |
C07K14/765(2006.01)I |
代理机构 |
济南舜源专利事务所有限公司 37205 |
代理人 |
苗峻 |
主权项 |
聚乙二醇修饰的人血白蛋白,由白蛋白分子上的34位半胱氨酸残基的巯基结合聚乙二醇构成,其特征是:所述34位半胱氨酸巯基定点单修饰所采用的修饰剂是聚乙二醇‑马来酰亚胺;所述修饰剂mPEG‑MAL的分子量范围为1000‑40000道尔顿,所述修饰剂mPEG‑MAL的形状为直链或分枝状;所述的聚乙二醇修饰人血白蛋白的制备方法,包括以下步骤:(1)将mPEG‑MAL与人血白蛋白,按摩尔比为2:1的比例溶于50mmol/L磷酸盐缓冲液中,在pH6.5,温度30℃条件下,轻轻振荡20h,即得白蛋白34位半胱氨酸的聚乙二醇定点单修饰产物;其中,上述白蛋白均以白蛋白的蛋白含量进行摩尔计算;(2)采用离子交换层析法分别对聚乙二醇修饰的人血白蛋白进行分离纯化,pH5.0‑7.0,10‑50mmol/L磷酸盐缓冲液平衡上样,0‑1mol/LNaCl线性梯度洗脱,收集洗脱峰,冷冻干燥,制得纯品;所述的磷酸盐缓冲液中含10mmol/L的EDTA。 |
地址 |
271000 山东省泰安市虎山东路14号 |