一种凝花菜愈伤组织的诱导方法

摘要

本发明公开了一种凝花菜愈伤组织的诱导方法，包括以下步骤：外植体暂养、外植体消毒、接种诱导、愈伤组织增殖或储存；本发明采用聚维酮碘和次氯酸钠配合使用的方法对凝花菜外植体进行消毒，可以获得大量无菌的外植体，采用本发明对凝花菜外植体进行诱导，有75%的外植体可以形成愈伤组织，愈伤组织不但可以进一步增殖，增殖的大量优质培养基可以进一步分化成再生芽或植株，愈伤组织还可以储存作为凝花菜的种质资源。

主权项

一种凝花菜愈伤组织的诱导方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）外植体的暂养：选择健康的、分枝少的植株用作组织培养，用手工刷去除附生植物和其他微生物；将凝花菜叶状体切成4‑5cm长的切段，并将切段于添加Ge0₂的PES培养液的充气瓶中培养1周，培养温度保持在20‑22°C，光强为白色荧光灯2000‑3000Lx，光照时间为12h；（2）外植体消毒：将步骤1中培养1周的凝花菜切段用1%的聚维酮碘浸泡1‑5min，再用1%的次氯酸钠溶液浸泡1‑5min，无菌海水冲洗干净；（3）接种诱导：将步骤3中消毒后的外植体置于无菌操作台中，切成3‑5mm的接种段，将接种段接种于固体PES诱导培养基中诱导愈伤组织的形成，培养条件为全黑暗、温度保持在20‑22°C； （4）愈伤组织增殖或储存：步骤3中获得的愈伤组织用作增殖或用作种质资源储存。