发明名称 一种脱色活性黑5的细菌的筛选方法
摘要 本发明涉及一种脱色多种活性染料的细菌的筛选方法,包括:(1)将活性染料污泥用无菌玻璃珠打散后制成的菌悬液接种于富集培养基中,使用含有不同浓度梯度的染料在富集培养基中驯化4周;(2)将驯化后的菌液,取OD值为1的菌液,做梯度稀释,每个稀释度的菌液均匀涂布到固体培养基上于35℃厌氧培养48h,重复此步骤直至固体培养基上长出的菌落大小均匀,边缘清晰;将分离到的单菌落划线至含染料的固体培养基上,观察菌落生长情况,将其接种于含染料的液体培养基中,观察菌株脱色效果,将脱色效果好的菌株进行保藏,即得。本发明分离纯化方法简便快捷,成本低,对环境友好,应用前景广阔。
申请公布号 CN102268388B 申请公布日期 2014.04.16
申请号 CN201110170426.8 申请日期 2011.06.22
申请人 东华大学 发明人 柳建设;于文娟;谢学辉;王兆慧;许贺;洪武林;张武刚
分类号 C12N1/20(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N 主分类号 C12N1/20(2006.01)I
代理机构 上海泰能知识产权代理事务所 31233 代理人 黄志达;谢文凯
主权项 一种脱色活性黑5的细菌的筛选方法,包括:(1)将活性染料污泥用无菌玻璃珠打散后制成的菌悬液接种于富集培养基中,使用含有不同浓度梯度的染料在富集培养基中驯化4周;其中,富集培养基为牛肉膏蛋白胨培养基,配方如下:牛肉膏5g/L,蛋白胨10g/L,氯化钠5g/L,蒸馏水1000mL;含有不同浓度梯度的染料为经滤菌的活性黑5,浓度梯度分别为50mg/L、100mg/L、150mg/L和200mg/L,改变浓度的时间间隔为7d;(2)将驯化后的菌液,取OD值为1的菌液,做梯度稀释,每个稀释度的菌液均匀涂布到固体培养基上于35℃厌氧培养48h,重复此步骤直至固体培养基上长出的菌落大小均匀,边缘清晰;将分离到的单菌落划线至含染料的固体培养基上,观察菌落生长情况,将其接种于含染料的液体培养基中,观察菌株脱色效果,将脱色效果好的菌株进行保藏,即得;其中固体培养基为步骤(1)中的牛肉膏蛋白胨培养基中加入17g/L的琼脂粉;含染料的固体培养基配方为牛肉膏5g/L,蛋白胨10g/L,氯化钠5g/L,琼脂20g/L,蒸馏水1000mL,染料50mg/L;含染料的液体培养基配方为牛肉膏5g/L,蛋白胨10g/L,氯化钠5g/L,蒸馏水1000mL,染料50mg/L。
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