一种从花椒油中提取羟基山椒素的方法

摘要

本发明公开的一种从花椒油中提取羟基山椒素的方法，其工艺步骤是：1）将花椒油用甲醇依次进行室温浸提、离心分离、层析除多酚、冷冻、旋转蒸发得浓缩物；2）先将浓缩物用甲醇溶解后，用硅胶柱进行梯度洗脱并等份收集洗脱液，再将薄层层析法初步确定的目标物所在的洗脱液进行浓缩干燥；3）将所得浓缩物用制备型液相色谱进行细分纯化，并分别收集两个最大吸收峰的洗脱液进行旋转蒸发即得羟基山椒素Ⅰ和Ⅱ。本发明提供的方法不仅填补了现有技术的空白，为该领域提供了一种可作为花椒麻味定量的标准品，且前处理简单、操作方便，分离提纯的分离物纯度高。

主权项

一种从花椒油中提取羟基山椒素的方法，其特征在于其工艺步骤和条件如下：（1）在20～40ml的花椒油中，按体积比1:20～30加入甲醇，先室温机械振荡20～30min，然后在超声频率35～55Hz下超声振荡5～10min，再将浸提液在2500～3000r/min的速度下，离心10～15min，取上清液，过Al₂O₃层析柱除去多酚，‑20℃以下避光冷冻12～18小时，将提取液在≤40℃下进行旋转蒸发，即得浓缩物；（2）先将浓缩物用3～4ml体积百分比浓度为50～80%甲醇溶解，并按样品与硅胶柱质量比1:40～50上样，然后用体积百分比浓度为70～80%的甲醇，以洗脱流速0.5～1.5ml/min进行等梯度洗脱，且按每份收集量为80～120ml等份收集洗脱液，并结合薄层层析法，将初步确定的目标物所在的洗脱液在≤40℃下进行旋转蒸发，即得浓缩物；（3）将所得浓缩物用色谱级甲醇先稀释至5～10mg/ml，然后用制备型液相色谱进一步纯化，并分别收集两个最大吸收峰的洗脱液在≤40℃下进行旋转蒸发即得羟基山椒素Ⅰ和Ⅱ，其中所述的薄层层析法是：用体积比1:9的甲醇和氯仿混合液作为展开剂，将上述洗脱液在薄层板上进行点样，展开，并置于254nm的紫外灯下，将出现明显紫色斑点的第二组分确定为目标物所在组分。