一种用于脂溶性农药残留非竞争检测的肽配体制备方法

摘要

本发明公开了一种用于脂溶性农药残留非竞争检测的肽配体制备方法。先将β-环糊精（β-CD）与牛血清白蛋白（BSA）偶联，偶联产物产物包被固相载体用于包合毒死蜱；再采用“正负交替筛选”策略对商业化的噬菌体展示多肽库进行四轮筛选；从第四轮筛选洗脱产物中分离挑选出单个噬菌体克隆，并利用ELISA方法鉴定出能够特异识别“β-CD-农药”复合物的噬菌体克隆；最后对所鉴定出的噬菌体克隆进行测序以确定其有多肽片段插入并获得多肽的氨基酸序列信息。本发明的优点是：不需对检测对象进行分子改造；所获得的肽配体可用于构建农药残留的非竞争检测模式。

主权项

一种用于脂溶性农药残留非竞争检测的肽配体制备方法，其特征在于，该方法借助环糊精对农药分子的包合效应，采用噬菌体展示技术进行多肽筛选，具体包括下列步骤：（1）将β‑环糊精与牛血清蛋白进行偶联，制备出β‑CD‑BSA偶联物，并包被固相载体用于脂溶性农药的包合；（2）采用“正负交替筛选”策略对商业化的噬菌体展示多肽库进行四轮筛选；（3）从第四轮筛选产物中分离挑选出单个噬菌体克隆，并利用ELISA方法鉴定出能够特异识别“β‑CD‑农药”复合物的噬菌体克隆；（4）最后对所鉴定出的阳性噬菌体克隆进行测序以确定其有多肽片段插入，并由测得的DNA序列翻译出氨基酸序列。