一种高特异高敏感检测分泌肠毒素蜡样芽孢杆菌的方法

摘要

本发明公开了一种高特异高敏感检测分泌肠毒素蜡样芽孢杆菌的方法，包括以下步骤：步骤1）制备反应液；步骤2）提取临床分离分泌肠毒素蜡样芽胞杆菌，分泌呕吐毒素蜡样芽胞杆菌、环境分离蜡样芽胞杆菌，以及若干临床分离金黄色葡萄球菌、头皮葡萄球菌、人型葡萄球菌、表皮葡萄球菌、草绿色链球菌、大肠杆菌、克雷伯菌的核酸，多次进行反应，观察它们的阴阳性。本发明通过配制反应液，设计引物序列，能快速、准确的检测出蜡样芽胞杆菌，提高了致病性蜡样芽胞杆菌的检测和诊断效率，对确定有效的治疗方案具有很大的指引作用。

主权项

一种高特异高敏感检测分泌肠毒素蜡样芽孢杆菌的方法,其特征在于,包括以下步骤：步骤1）制备反应液反应液组成及含量为8u/ul Bst核酸聚合酶                        8u10X耐热聚合酶反应缓冲液               1X，MgSO4 2mM4M 甜菜碱                                   1M10mM d‑NTP混合液                          400μM内引物   BCE‑FIP                                 40umol   BCE‑BIP                                 40umol外引物    BCE‑F3                                 5umol    BCE‑B3                                 5umol标本核酸                                   20ng添加焦碳酸二乙酯处理水至总量达到25ul；步骤2）提取临床分离分泌肠毒素蜡样芽胞杆菌，分泌呕吐毒素蜡样芽胞杆菌、环境分离蜡样芽胞杆菌，以及若干临床分离金黄色葡萄球菌、头皮葡萄球菌、人型葡萄球菌、表皮葡萄球菌、草绿色链球菌、大肠杆菌、克雷伯菌的核酸，多次进行反应，观察它们的阴阳性。