发明名称 一种紫玉兰组织培养方法
摘要 本发明提供一种紫玉兰组织培养方法,该紫玉兰组织培养方法是在开放式条件下进行,该方法其中包括对对紫玉兰组织培养场地的灭菌抑菌处理、外植体的选择、外植体的灭菌消毒、外植体的初代培养,增殖培养和生根培养等步骤。本发明中紫玉兰组织培养方法在开放式条件下进行,可以在开放的条件下进行,节约了成本;对紫玉兰的灭菌保证了外植体无菌污染,提高其培养成活率;用2%PVP浸泡外植体以及在培养基中加入2%PVP,减轻了外植体的褐化,提高其成活率。该紫玉兰组织培养方法是在操作简单,时间短,成本低廉,成活率高、生根率高,能实现短期内的出瓶移栽,并能够保持原品种的优良性状,为良种繁育和产业化生产奠定基础。
申请公布号 CN103718966A 申请公布日期 2014.04.16
申请号 CN201310730707.3 申请日期 2013.12.25
申请人 陈凤花 发明人 陈凤花
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 代理人 刘冬梅;罗娟
主权项 一种紫玉兰的组织培养方法,其特征在于,该组织培养方法是在开放式条件下进行,其方法包括以下步骤:(1)对进行紫玉兰组织培养的场地的消毒灭菌;(2)外植体的选择:选择直径为1~2cm带有腋芽的紫玉兰枝条为外植体;(3)外植体的消毒:先用自来水冲洗8~12min,然后用浓度为0.1%的升汞和吐温混合物浸泡7~13min,最后用无菌水冲洗4~6次;(4)初始诱导培养:将灭菌后的外植体用2%PVP浸泡2~5min,然后将该茎段按末端向上插入基本培养基WPM中,在22~26℃,光强2000~3000Lxt条件下进行初始培养;3~5天后观察,将未污染的植物茎段转入新的培养基中,继续培养10~15天至新芽长出;(5)伸长培养:将长出新芽的外植体茎段转插入伸长培养基中进行新芽的伸长培养,在22~26℃,光强2000~3000Lxt条件下培养15~20天,至新芽伸长到0.2~0.6cm;(6)增殖培养:将长出的新芽接入含有生长调节物质BA1.0mg/L和NAA0.1mg/L的WPM基本培养基中,在22~26℃,光强2000~3000Lxt条件下培养23~26天;(7)生根培养:将增殖培养得到的组培苗在4~7℃冷藏10~14天,转接到加入了NAA1.0mg/L的WPM培养基中继续培养15~20天;将组培苗转接到加入2%PVP的WPM培养基中继续培养10~15天,生根后进行炼苗;将生根苗移接到室外进行培养。
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