神经组织基质源性组织工程支架材料的制备及其应用

摘要

本发明公开了一种神经组织基质源性组织工程支架材料的制备及其应用。以神经组织为原料，通过药物膨胀、机械粉碎、酶解处理、透析收集等手段提取出利于神经再生的基质成分(包括纳米级胶原微丝、纤粘蛋白微丝和层粘蛋白微丝)，去除了不利于神经再生的免疫原性成分(包括雪旺细胞、磷脂和轴突)。所制备出的神经组织基质源性材料单独或配以其他高分子材料可进一步通过定向结晶、冷冻干燥和交联制备成三维多孔取向支架，或者利用电纺丝技术制备纳米级别薄膜，再缠绕形成神经再生导管。本发明方法制备的组织工程用支架或导管有利于种子细胞粘附、增殖、迁移，促进神经再生，可用于神经缺损修复。

主权项

一种神经组织基质源性组织工程支架材料的制备方法，包括如下步骤：1‑1.以神经组织为原料，在去除神经周围的脂肪和结缔组织后用无菌蒸馏水漂洗多次；1‑2.在含有蛋白酶抑制剂的缓冲液中将神经组织机械粉碎为小块；1‑3.将神经组织小块浸泡于pH3‑5的柠檬酸盐缓冲液，4℃条件下持续振荡24～72小时，然后用无菌蒸馏水漂洗多次；1‑4.在蛋白酶抑制剂存在的条件下用细胞裂解液处理，随后用缓冲液漂洗；1‑5.DNA酶和RNA酶消化6～48h；1‑6.加入尿素溶液中浸泡，随后再次进行机械粉碎；1‑7.离心去除未溶解物质，上清液经透析除去尿素得到神经基质源性浆料。