一种新的烟草黑胫病抗性快速鉴定方法

摘要

本发明公开了一种新的烟草黑胫病抗性快速鉴定方法，包括育苗、烟苗移植及日常管理、接种体制备及烟苗切茎接种黑胫菌、病情调查与分级等步骤。本发明直接采用漂浮育苗，不需要移栽缓苗，用漂浮池恒温水培接种鉴定结果代替传统的土壤盆栽和大田鉴定结果，采用茎部切断创伤接种法代替传统的茎基部创伤接种法。减少环境温度和湿度对鉴定结果的影响，避免其他病害对鉴定结果的干扰，提高鉴定结果的准确性，减少菌种培养和接种后发病调查时间，采用茎部切断创伤法接种伤口大小基本一致，接种时易于操作，避免由于不同人员操作引起的伤口大小差异，从而减少人为误差。

主权项

一种新的烟草黑胫病抗性快速鉴定方法，其特征在于步骤为：（1）烟苗移植及日常管理烟苗三次剪叶后，苗龄60d，每个待鉴定材料挑选45株，移植到新的漂浮盘中；以小黄金1025作对照，红花大金元作辅助对照，漂浮池营养液的氮素浓度控制在100 mg/kg～250 mg/kg，根据池水蒸发量，经常补充池水至初始水深；（2）接种体制备及接种烟草黑胫病菌活化后，接种燕麦固体培养基，28℃培养2周；茎部高度5cm处用无菌解剖刀切断，用打孔器打取0.5cm菌丝块，贴于茎部切断处，菌丝面朝下，每株接种1个菌丝片，上套5mL移液枪枪头保湿，每品种设3个重复，每重复接种15株；接种后将育苗盘放入28℃恒温池，日常管理；（3）病情调查接种后2 d调查发病情况，以后每隔2d调查一次发病情况；记录发病率及病情指数，以感病对照发病率达到70% 的病情指数作为品种抗性评价标准；（4）病害严重度分级以株为单位分级调查，0级：茎部绿色，无病斑；1级：茎部病斑不超过茎围；3级；茎部病斑环绕茎围，病斑高度不超过茎高的三分之一；5级：茎部病斑环绕茎围，病斑高度占茎高的三分之一至三分之二；7级：茎部病斑环绕茎围，病斑高度超过茎高的三分之二以上；9级：茎部全部变色，死亡。