丙型肝炎病毒五种亚型的RT-PCR检测试剂盒及方法

摘要

本发明涉及一种疾病病原体基因检测技术，尤其涉及一种检测样本中HCV 1b、2a、3a、3b和6a亚型病毒核酸存在的方法及试剂盒。本发明的技术方案为提供一种丙型肝炎病毒五种亚型的RT-PCR检测试剂盒，该试剂盒包括：RNA提取液，PCR反应液，RT-PCR酶系，阳性质控品，阴性质控品，所述PCR反应液包括：1条逆转录引物：SEQ ID NO.1，2条丙型肝炎病毒特异性扩增引物：SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3，检测探针5条：SEQ ID NO.4到SEQ ID NO.8。本发明的有益效果为本发明试剂盒可以检测HCV 1b、2a、3a、3b和6a亚型单独感染和混合感染，检测通量较高，灵敏度、特异性高，可以区分常见亚型，检测结果可借助分析软件自动判断；成本低，操作简单，检测时间短。

主权项

丙型肝炎病毒五种亚型的RT‑PCR检测试剂盒，其特征在于，包括：RNA提取液，PCR反应液，RT‑PCR酶系，阳性质控品，阴性质控品，所述PCR反应液包括：引物L‑pri‑C1：5’‑ACTGCCTGATAGGGTGCTTGCGAG‑3’；引物L‑pri‑C2：5’‑AATTGCCAGGACGACCGGGTCCTT‑3’；引物L‑pri‑C3：5’‑GAAAGCGTCTAGCCATGGCGTTAGT‑3’；探针L‑pro‑C1：5’‑CCCGCTCAATGCCTGGAGATTTGGGC‑3’；探针L‑pro‑C2：5’‑GGAATTGCCGGGAAGACTGGGTCCTTTC‑3’；探针L‑pro‑C3：5’‑ACCGGAATCGCTGGGGTGACCGGGTCC‑3’；探针L‑pro‑C4：5’‑AACCCGCTCAATGCCCGGAAATTTGG‑3’；探针L‑pro‑C5：5’‑CCCGCTCAATGCCTGGAGATTTGGGCGT‑3’；所述探针5’端用荧光染料标记，3’端用淬灭荧光染料标记。