快速检测皮革真实属性的试剂盒及其方法

摘要

本发明公开了一种快速检测皮革真实属性的试剂盒及其检测方法，所述试剂盒包括DNA提取缓冲液、Taq DNA聚合酶、PCR反应液、上样缓冲液。本发明从遗传学角度对皮革样品基因成分进行分析鉴别，克服了传统的感官鉴别方法所面临的难题，具有特异性强、灵敏度高、方法重现性好、检测快速简便等优点，弥补了当前皮革基因检测方法的空白，为皮革种类的鉴定提供了一种精确且易于标准化的分析方法，为质量监督等提供了技术支持，可广泛应用于皮革包括毛皮等样品基因的提取、皮革品种鉴定等方面，具有良好的经济社会效益与重大的推广应用价值，对于有效监管皮革产品质量，保护广大消费者利益具有重大意义。

主权项

一种快速检测皮革真实属性的试剂盒，其特征在于，包括：(1)DNA提取缓冲液所述DNA提取缓冲液的组成为：15～25mg/LCTAB、90～110nmol/LTris‑HCl、15～25mmol/LEDTA2Na、1.3～1.5mol/LNaCl、0.09～0.12g/L蛋白酶K、0.9～1.1mol/LDTT；(2)TaqDNA聚合酶，所述TaqDNA聚合酶的浓度为125IU；(3)PCR反应液所述PCR反应液的组成为：2.7～3.3mmol/LMgCl2，0.3～0.5μmol/L引物，0.3～0.5mmol/LdNTPs；所述引物为针对动物源性基因序列的通用引物SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2；所述引物还包括针对牛、羊、猪、马或兔的线粒体基因序列的引物；所述针对牛线粒体基因序列的引物为SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；所述针对羊线粒体基因序列的引物为SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6，所述针对猪线粒体基因序列的引物为SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8；所述针对马线粒体基因序列的引物为SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10；所述针对兔线粒体基因序列的引物为SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12。(4)上样缓冲液所述上样缓冲液的组成为：2.0～3.0g/L溴酚蓝、350～450g/L蔗糖。