主权项 |
一种利用DNA甲基化的方法检测苯丙酮尿症的试剂盒,包括dNTP、10xPCR buffer、MgCl2、ddH2O、Taq DNA聚合酶,其特征在于,还包括标准血液DNA、引物MSP‑R、引物MSP‑L、引物UMSP‑R、引物UMSP‑L、引物BSP‑R1、引物BSP‑L1、引物BSP‑R2、引物BSP‑L2;所述引物MSP‑R的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示,引物MSP‑L的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.2所示,引物UMSP‑R的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.3所示,引物UMSP‑L的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.4所示,引物BSP‑R1的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.5所示,引物BSP‑L1的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.6所示,引物BSP‑L2的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.7所示,引物BSP‑R2的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.8所示;上述引物用于做甲基化特异性PCR,PCR时,引物的配对方案为:引物MSP‑R、MSP‑L配对,引物UMSP‑R、UMSP‑L配对,引物BSP‑R1、BSP‑L1配对,引物BSP‑R2、BSP‑L2配对,用于检测ASS基因,其Genbank ID为NG_011542,启动子区甲基化情况;所述标准血液DNA为取自无苯丙酮尿症健康人血液提取的基因组DNA并经过重亚硫酸盐处理。 |