发明名称 |
一种喉鳞癌软骨侵袭模型 |
摘要 |
本发明公开了一种喉鳞癌软骨侵袭模型,其包括喉鳞癌侵袭体外实验模型、喉鳞癌软骨侵袭半离体试验模型和喉鳞癌软骨侵袭体内试验模型。以聚碳酸脂微孔滤膜封闭Transwell小室杯底;人工重建基底膜Matrigel涂在滤膜上;待Matrigel形成凝胶状后,将Transwell小室放入培养孔中,用紫外线照射2h杀菌备用;下室加入含10%小牛血清的RPMI1640培养基,喉鳞癌Hep-2细胞均匀加入上室,培养后轻轻拭去杯底部Matrigel胶和未浸润的细胞,乙醇固定,结晶紫染色;计数穿膜细胞数并取其平均值,以穿膜细胞的相对数目代表侵袭力。该发明能够有效的建立喉鳞癌软骨侵袭模型,探讨喉鳞癌对软骨的侵袭机制,对预防喉鳞癌转移、复发以及选择有效的个性化治疗方案起到极大作用。 |
申请公布号 |
CN102181397B |
申请公布日期 |
2014.04.02 |
申请号 |
CN201110039718.8 |
申请日期 |
2011.02.17 |
申请人 |
四川大学华西医院 |
发明人 |
邹剑;吴江;杨慧;陈飞;刘世喜 |
分类号 |
C12N5/09(2010.01)I;A61K49/00(2006.01)I |
主分类号 |
C12N5/09(2010.01)I |
代理机构 |
成都蓉信三星专利事务所(普通合伙) 51106 |
代理人 |
杨春 |
主权项 |
一种喉鳞癌软骨侵袭半离体试验模型的构建方法,其特征在于:包括以下步骤:第一步:取裸鼠喉软骨置于Transwell小室下层与10%小牛血清的RPMI1640 培养基共培养;第二步:各实验组喉鳞癌Hep‑2细胞置上层;第三步:培养后轻轻拭去杯底部Matrigel胶和未浸润的细胞,乙醇固定,结晶紫染色;第四步:光镜下观察并随机选取4个视野,计数穿膜细胞数并取其平均值,以穿膜细胞的相对数目代表侵袭力。 |
地址 |
610000 四川省成都市武侯区国学巷37号 |