一种甘精胰岛素前体的复性方法

摘要

本发明公开了一种甘精胰岛素前体的复性方法，属于生物医药蛋白折叠领域。本发明通过将甘精胰岛素前体溶解于变性剂溶液中，加入还原剂进行还原，调节pH值为9.5～11.5，控制反应体系的温度为35℃～45℃，反应30～60min，获得变性后的甘精胰岛素前体溶液；将变性后的甘精胰岛素前体加入稀释缓冲液中，再加入蛋白质折叠添加剂，调节pH值为9.5～11.5，向溶液中持续通入空气，控制反应体系的温度0℃～20℃，反应2～40小时，获得甘精胰岛素复性液。本发明缩短了复性反应时间，提高了正确折叠的蛋白含量，复性效率提高至51%～62%，同时降低了生产成本，适合工业化大生产应用。

主权项

一种甘精胰岛素前体的复性方法，其特征在于包括如下步骤：将甘精胰岛素前体溶解于变性剂溶液中，得到溶液I；再加入还原剂进行还原，调节pH值为9.5～11.5，控制反应体系I的温度为35℃～45℃，反应30～60min，获得变性后的甘精胰岛素前体溶液；将变性后的甘精胰岛素前体溶液加入稀释缓冲液中，得到溶液II；向溶液II中加入蛋白质折叠添加剂，调节pH值为9.5～11.5；接着向得到的溶液中持续通入空气，控制反应体系II的温度为0℃～20℃，反应2～40小时，获得甘精胰岛素复性液。