一种利用反义寡核苷酸沉默拟南芥内源miRNA的方法

摘要

本发明公开了一种利用反义寡核苷酸沉默拟南芥内源miRNA的方法，属于反义寡核苷酸的应用技术领域。本发明的方法是用miRNA反义寡核苷酸的水溶液浸泡拟南芥根系，使miRNA反义寡核苷酸导入植物细胞，从而实现在植物活体中特异性地沉默目标miRNA。该方法具有操作简便快捷，干扰效果显著、稳定持久的优点，避免了现有方法由于依赖转基因技术因而实验周期长、费时费力的缺点；同时也打破了利用糖溶液介导实现反义寡核苷酸跨膜运输的局限性，为拟南芥miRNA功能研究提供了新的技术手段。

主权项

一种利用反义寡核苷酸沉默拟南芥内源miRNA的方法，其特征在于是用miRNA反义寡核苷酸的水溶液浸泡拟南芥根系，使miRNA反义寡核苷酸导入植物细胞；所述拟南芥为植物活体的幼苗或成体；所述浸泡为一次性浸泡或间隔多次浸泡，每次浸泡时间为24小时，每两次浸泡之间的间隔时间为1‑3天，间隔期间拟南芥植株正常培养生长；所述miRNA反义寡核苷酸的水溶液中miRNA反义寡核苷酸的浓度为2.5μM；所述miRNA反义寡核苷酸是采用2'‑O‑methyl修饰并与相应的miRNA成熟体序列完全互补的序列。