人β-NGF的重组表达载体及含该载体的重组细胞株

摘要

本发明公开了一种可稳定、高效表达人β-NGF的重组表达载体，含有该重组表达载体的重组真核细胞，以及一种生产重组人β-NGF的方法。本发明所述重组表达载体包含启动子、β球蛋白基因内含子、人β-NGF基因、内部核糖体进入位点序列和筛选标记基因，在宿主细胞中的整合、表达效率较高。含该重组表达载体的重组真核细胞表达与天然β-NGF活性相当的重组人β-NGF，且经多次传代后仍能稳定表达；所表达的β-NGF分泌到培养基中，易分离、纯化，大大降低了生产下游的难度和成本，具有很好的临床应用前景和商业价值。

主权项

一种表达人β‑NGF的重组表达载体，其特征在于，依次包含以下可操作性相连的元件：启动子、β球蛋白基因内含子、人β‑NGF基因、内部核糖体进入位点序列和筛选标记基因；所述β球蛋白基因内含子序列如SEQ ID No.1所示，人β‑NGF基因序列如SEQ ID No.2所示，内部核糖体进入位点序列如SEQ ID No.3所示，所述启动子为CMV启动子、PGK启动子、RSV启动子或SV40启动子中的任意一种。