发明名称 用于检测ALK- 1基因突变的引物组、该引物组的用途及包含该引物组的试剂盒
摘要 本发明公开了用于检测ALK-1基因突变的引物组,至少包括ALK-1基因第1到第10外显子区,3’UTR和启动子中任一区域对应的PCR扩增引物组和PCR测序引物组。本发明还公开了所述引物组的用途、包含所述引物组的试剂盒以及使用所述引物组对ALK-1基因进行PCR扩增方法。所述的引物组可以专一性鉴别ALK-1基因是否突变,确保了测定结果的准确性和唯一性。
申请公布号 CN102994628B 申请公布日期 2014.04.02
申请号 CN201210255552.8 申请日期 2012.07.23
申请人 广州医学院第一附属医院 发明人 卢文菊;张晨婷;王健
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 广州知友专利商标代理有限公司 44104 代理人 宣国华;马赟斋
主权项 用于检测ALK‑1基因突变的引物组,其特征在于,包括ALK‑1基因的第1到第10外显子区、3’UTR和启动子分别对应的PCR扩增引物组以及PCR测序引物组,其中,所述的PCR扩增引物组为:所述启动子的PCR扩增引物组包括:由引物 PF1和引物PR1组成的引物组、和由引物PF2和引物PR2组成的引物组,引物PF1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,引物PR1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,引物PF2的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,引物PR2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;所述Exon1的PCR扩增引物组包括:由引物PF3和引物PR3组成的引物组,引物PF3的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示,引物PR3的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示;所述Exon2的PCR扩增引物组包括:由引物PF4和引物PR4组成的引物组,引物PF4的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示,引物PR4的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示;所述Exon3的PCR扩增引物组包括:由引物PF5和引物PR5组成的引物组,引物PF5的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示,引物PR5的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示;     所述Exon4的PCR扩增引物组包括:由引物PF6和引物PR6组成的引物组,引物PF6的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示,引物PR6的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示;所述Exon5的PCR扩增引物组包括:由引物PF7和引物PR7组成的引物组,引物PF7的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示,引物PR7的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示;所述Exon6的PCR扩增引物组包括:由引物PF8和引物PR8组成的引物组,引物PF8的核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示,引物PR8的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示;所述Exon7的PCR扩增引物组包括:由引物PF9和引物PR9组成的引物组,引物PF9的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示,引物PR9的核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示;所述Exon8的PCR扩增引物组包括:由引物PF10和引物PR10组成的引物组,引物PF10的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示,引物PR10的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示;所述Exon9的PCR扩增引物组包括:由引物PF11和引物PR11组成的引物组,引物PF11的核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示,引物PR11的核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示;所述Exon10的PCR扩增引物组包括:由引物PF12和引物PR12组成的引物组,引物PF12的核苷酸序列如SEQ ID NO.23所示,引物PR12的核苷酸序列如SEQ ID NO.24所示;所述3’UTR的PCR扩增引物组包括:由引物 PF13和引物PR13组成的引物组、由引物 PF14和引物PR14组成的引物组,和由引物PF15和引物PR15组成的引物组,引物PF13的核苷酸序列如SEQ ID NO.25所示,引物PR13的核苷酸序列如SEQ ID NO.26所示,引物PF14的核苷酸序列如SEQ ID NO.27所示,引物PR14的核苷酸序列如SEQ ID NO.28所示,引物PF15的核苷酸序列如SEQ ID NO.29所示,引物PR15的核苷酸序列如SEQ ID NO.30所示;所述的PCR测序引物组为:所述启动子的PCR测序引物组包括:核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的引物 PF1,和核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的引物PF2;所述Exon1的PCR测序引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的引物PF3;所述Exon2的PCR测序引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示的引物PF4;所述Exon3的PCR测序引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示的引物PF5;所述Exon4的PCR测序引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示的引物PF6;所述Exon5的PCR测序引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示的引物PF7;所述Exon6的PCR测序引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示的引物PF8;所述Exon7的PCR测序引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示的引物PF9;所述Exon8的PCR测序引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示的引物PF10;所述Exon9的PCR测序引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示的引物PF11;所述Exon10的PCR测序引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.23所示的引物PF12;所述3’UTR的PCR测序引物组包括:核苷酸序列如SEQ ID NO.25所示的引物PF13,核苷酸序列如SEQ ID NO.27所示的引物PF14,和核苷酸序列如SEQ ID NO.29所示的引物PF15。
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