主权项 |
巨瓣兜兰的组培快繁方法,其特征是方法包括以下步骤:① 无菌培养物的建立,选取生长健壮的巨瓣兜兰母株, 在开花时进行人工授粉,授粉后180天,将发育至基本成熟而未开裂的果实作为外植体;②原球茎萌发阶段:选用饱满的果实用75%的酒精浸泡30 秒,置于0.1%的升汞溶液中消毒20分钟,无菌水冲洗4‑5次,切开果实,用接种针将褐色粉末状胚接种到1/2MS添加α‑萘乙酸(NAA)2毫克/升培养基上,培养60天左右,形成原球茎及芽;③增殖培养阶段:为获得更多的种苗,将芽和原球茎混合组织接种在1/2MS附加6‑苄基氨基嘌呤(6‑BA)20毫克/升培养基上,经120天培养,长成丛生带短根的小苗; ④壮苗生根阶段:将长成的丛生植株分开,接种到1/4MS添加吲哚乙酸(IAA)0.4毫克/升的培养基上,培养90天后长成具2‑3条根、3‑4片叶的完整植株;⑤炼苗及移栽:当试管苗长至3‑4厘米时,出瓶前在温室中的自然光照下炼苗7天,然后将其从玻璃瓶中取出,洗净根部的培养基,移入碎树皮和水苔的混合基质中;温室保持15‑28℃的温度、70%以上的湿度、78‑80%的遮阴并通风,巨瓣兜兰即可正常生长,成苗的移栽成活率可达90%以上;通常15天左右浇一次发酵的油枯水或叶面肥,其浓度为稀释1000倍质量比,薄肥勤施,加强病虫害管护措施即可建立巨瓣兜兰种苗的产业化培育方法。 |