一种判断花鲈养殖水体的方法

摘要

本发明公开了一种判断花鲈养殖水体的方法，具体包括待判断花鲈组织总RNA抽提、cDNA第一条链合成，PCR扩增催乳素受体基因，最后通过观察PCR扩增产物的凝胶电泳照片上是否有催乳素受体基因表达条带来判断所检测的花鲈是淡水养殖还是海水养殖。本发明公开的方法简单、准确，可应用于水产品领域的监管。

主权项

一种判断花鲈养殖水体的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取待判断花鲈组织的总RNA，所述组织为鳃或肾脏组织；（2）根据M‑MLV逆转录酶试剂盒的操作说明，以上述总RNA为反应物合成cDNA第一条链；（3）分别以引物SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2为正向引物和反向引物，以上述cDNA第一条链为模板，在PCR buffer、dNTP、Taq酶以及灭菌的去离子水存在下，进行PCR扩增反应得到扩增产物；（4）利用凝胶电泳检测上述扩增产物，如果电泳图上有催乳素受体基因表达条带，则待判断花鲈的养殖水体为海水，如果电泳图上没有催乳素受体基因表达条带，则待判断花鲈的养殖水体为淡水；即完成花鲈养殖水体的判断；其中，SEQ ID NO.1为5’‑ CAACATCACCGTGGTGGCCACCAACGC‑3’； SEQ ID NO.2为5’‑ TCGCAGCTGCCCCGGCCGGAGT‑3’。