鉴定亲和力成熟的人类抗体

摘要

从一个核酸文库中鉴定抗原特异性免疫球蛋白V区，该核酸文库是通过使用了前导序列特异性正向引物的聚合酶链式反应而扩增的。使用前导序列引物允许扩增所有的V区序列（包括具有大量5’末端突变的那些），而没有丢失原始的5’V区基因区段序列。可以使用被工程化为表达所扩增的V区编码核酸的真核细胞或使用细菌噬菌体展示技术，针对抗原特异性V区对这些文库进行筛选。在后者情况下，使用比常规组的5’V区引物更大的引物制备一个第二V区文库。经由这种方法通过以下方式修正被引入这些扩增产物中的序列错误：使用在通过这些V区引物所扩增的产物中获得的序列信息，以筛选使用这些前导序列引物创建的文库。来自供体免疫球蛋白的片段的氨基酸序列信息可以用于辅助对编码了供体抗体的重链和轻链的核酸的鉴定，以及用于设计用来扩增此类核酸的引物。

主权项

一种前导区特异性引物，用于扩增对一种人类免疫球蛋白的V区进行编码的核酸。