发明名称 | 一种利用数字PCR检测食品中大肠菌群数量的方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种利用数字PCR检测待测食品中大肠菌群数量的方法。该方法包括如下步骤:1)富集待测食品中的细菌,将富集物与DNA结合物共同孵育,获得PCR扩增模板;所述DNA结合物为不能穿过完整的细胞膜,但能与细胞膜受损后暴露出来的DNA结合的物质;2)配制PCR反应体系,进行数字PCR反应;所述PCR反应体系中含有所述PCR扩增模板、大肠菌群通用引物对、荧光染料、dNTP和DNA聚合酶;3)根据反应产生的荧光信号,计算所述待测食品中的大肠菌群数量。本方法无需对食品中细菌进行分离培养,检测时间短至3-4小时;同时减少了背景DNA和基质的干扰,灵敏度低至1个拷贝;且该方法无需设置标准曲线,根据结果可直接判读样品中的大肠菌群数量,大大简化了操作步骤。 | ||
申请公布号 | CN103667463A | 申请公布日期 | 2014.03.26 |
申请号 | CN201310613503.1 | 申请日期 | 2013.11.27 |
申请人 | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 | 发明人 | 陈爱亮;吴英;蒋小玲;吕珍珍;刘金钏;杨曙明 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/10(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人 | 关畅 |
主权项 | 数字PCR方法在检测食品中大肠菌群数量中的应用。 | ||
地址 | 100081 北京市海淀区中关村南大街12号 |