发明名称 一种分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法
摘要 本发明涉及DNA和RNA分离技术领域,公开了一种分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法,S1:总核酸的获取:准备细胞裂解液,利用有机溶剂将细胞裂解液中的蛋白质与脂类去除;S2:总RNA的分离:向步骤S1中的总核酸中加入氯化锂溶液,在低温静置后采用离心的方法分离出总RNA,将上清液中的宏基因组DNA转移放置;S3:宏基因组DNA的沉淀:取出步骤S2中所转移放置的上清液,利用预冷的异丙醇或乙醇将上清液中的宏基因组DNA沉淀,并在低温静置后采用离心的方法分离出宏基因组DNA;S4:宏基因组DNA与总RNA的纯化,采用乙醇洗涤纯化步骤S2和步骤S3中获得的总RNA和宏基因组DNA,采用离心的方法获得纯化后的总RNA和宏基因组DNA。本发明具有分离效果好、回收率高、成本低、操作简单的优点。
申请公布号 CN103642799A 申请公布日期 2014.03.19
申请号 CN201310732555.0 申请日期 2013.12.27
申请人 中南大学 发明人 刘新星;谢建平;云慧;邱冠周
分类号 C12N15/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤S1:总核酸的获取,准备细胞裂解液,并利用有机溶剂将细胞裂解液中的蛋白质与脂类去除;步骤S2:总RNA的分离,向步骤S1中的总核酸中加入氯化锂溶液,并在低温静置后采用离心的方法分离出总RNA,同时将上清液中的宏基因组DNA转移放置;步骤S3:宏基因组DNA的沉淀,取出步骤S2中所转移放置的上清液,利用预冷的异丙醇或乙醇将上清液中的宏基因组DNA沉淀,并在低温静置后采用离心的方法分离出宏基因组DNA;步骤S4:宏基因组DNA与总RNA的纯化,分别采用乙醇洗涤纯化步骤S2和步骤S3中获得的总RNA和宏基因组DNA,并分别采用离心的方法获得纯化后的总RNA和宏基因组DNA。
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