一种抗丙肝病毒的中和性单克隆抗体的制备及其应用

摘要

本发明公开了一种抗丙肝病毒的中和性单克隆抗体的制备及其应用。用pVAX-CpG-N2N8免疫小鼠后，再用E2蛋白加强免疫；将针对E2抗体效价最高的小鼠取脾作为抗原致敏的B细胞，与骨髓瘤细胞SP2/0株融合，再将融合细胞在HAT培养基中筛选，获取融合细胞生长克隆得到产生本发明单抗的杂交瘤细胞株。本发明的抗丙肝病毒E2的中和性单克隆抗体由所述杂交瘤细胞株产生，该单克隆抗体结合的表位位于E2糖蛋白的F550GCTWMNSTGFTKVCGAPPCVIG572部位。本发明的抗丙肝病毒E2的中和性单克隆抗体具有很好的中和HCV感染能力，可作为丙型肝炎病毒治疗性抗体，在丙肝诊断与治疗中具有巨大应用前景。

主权项

一种产生抗HCV E2糖蛋白的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于包含以下步骤：（1）用重组质粒pVAX‑1‑CpG‑N2N8免疫Balb/c小鼠后，再用E2蛋白加强免疫；检测免疫小鼠血清针对E2蛋白的抗体效价；（2）将针对E2蛋白抗体效价最高的小鼠无菌取脾作为抗原致敏的B细胞，并将其与骨髓瘤细胞SP2/0株融合，再将融合细胞在HAT培养基中筛选，获取融合细胞生长克隆得到产生抗HCV E2糖蛋白的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。