发明名称 利用高含盐氨基酸废水发酵生产饲用枯草芽孢杆菌的方法
摘要 本发明公开了一种利用高含盐氨基酸废水发酵生产饲料用枯草芽孢杆菌的方法。步骤为:1.饲料菌株的驯化培养:通过连续驯化培养的手段,提高菌株对高含盐氨基酸废水的耐受力;2.菌株的发酵,在合适的发酵条件下,于发酵罐中通过一定时间的液体通气培养后得到饲料用枯草芽孢杆菌菌体。离心收集菌体后于70℃烘箱内干燥至恒重后称重。经计算每升高含盐氨基酸废水最高可获得35g饲用枯草芽孢杆菌菌体。利用本方法,可有效利用废水中含有的氨基酸、微量元素和生长因子,大大降低饲用枯草芽孢杆菌的发酵成本,同时还大为减小了污水处理负荷,达到了综合利用的效果,具有显著的经济与社会效益。
申请公布号 CN103642729A 申请公布日期 2014.03.19
申请号 CN201310645592.8 申请日期 2013.12.03
申请人 湖北工业大学 发明人 杨波;胡征;刘志刚
分类号 C12N1/20(2006.01)I;C12R1/125(2006.01)N 主分类号 C12N1/20(2006.01)I
代理机构 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人 王敏锋
主权项 一种利用高盐氨基酸废水发酵生产饲料用枯草芽孢杆菌的方法,其步骤是:(1)饲料菌株的连续驯化培养,具体如下:先配制含不同浓度梯度的高含盐氨基酸污水的液体培养基,加1.5%‑2.5%质量体积比琼脂制成固体培养基;将饲料用枯草芽孢杆菌按常规方法活化后,依次接种到上述不同浓度梯度的固体培养基上进行连续传代培养,培养温度为15‑35℃,逐步提高菌种的耐盐能力;经过两个月的连续培养,最终菌株能在高含盐氨基酸废水占培养基总质量28‑38%的上述培养基中生长;(2)发酵:将步骤(1)驯化的枯草芽孢杆菌菌株按接种量0.5‑5%接种至以高含盐氨基酸废水为氮源的发酵培养基中,在15‑35℃,转速为100‑300 rpm/min条件下于发酵罐中进行液体发酵,通气系数为0.2‑0.8,发酵2 d后 4000 r/min离心10 min收集菌体后将其置于70℃恒温干燥箱中,干燥至恒重后称重;所述的高含盐氨基酸废水来自毛发酸法水解生产氨基酸的企业工业生产中产生的废水,全氮含量为75‑150 g/L,氨基酸含量为150‑300 g/L,氯离子含量为80‑180 g/L;所述的饲料用枯草芽孢杆菌来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心:解淀粉芽孢杆菌植物亚种(Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum)CICC 20037;所述的含不同浓度梯度的高含盐氨基酸废水的液体培养基,其高含盐氨基酸废水的浓度分别为125 g/L,250 g/L,330 g/L,其他化学基质组分为:碳源:30‑90 g/L,磷酸二氢钾:3‑15 g/L,酵母粉:0‑10 g/L,硫酸镁:0.3‑9 g/L,碳酸钙:0‑2 g/L,硫酸亚铁:0‑4 g/L;培养基pH为7‑8;其中,碳源为下述的一种或多种糖类的混合物:葡萄糖;蔗糖;糖蜜;玉米淀粉酶解液;红薯淀粉酶解液或木薯淀粉酶解液;所述的高含盐氨基酸废水为氮源的发酵培养基,其配方为:高含盐氨基酸污水125 g/L‑330 g/L,碳源:30‑90 g/L,磷酸二氢钾:3‑15 g/L,酵母粉:0‑10 g/L,硫酸镁:0.3‑9 g/L,碳酸钙:0‑2 g/L,硫酸亚铁:0‑4 g/L,培养基pH为6‑8;其中,碳源为下述的一种或多种糖类的混合物:葡萄糖;蔗糖;糖蜜;玉米淀粉酶解液;红薯淀粉酶解液或木薯淀粉酶解液。
地址 430068 湖北省武汉市洪山区李家墩一村一号
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