一种荧光传感器蛋白、相应质粒和编码基因及其制备方法

摘要

发明涉及用于检测亚铜离子的荧光传感器蛋白，检测时信号变化明显，同时可减少锌离子对亚铜离子检测的干扰。本发明还涉及表达上述荧光传感器蛋白的质粒或细胞，以及编码上述荧光传感器蛋白的DNA及其制备方法。所述用于检测亚铜离子的荧光传感器蛋白，在增强绿色荧光蛋白内插入对亚铜离子响应的蛋白域，得到所述荧光传感器蛋白，使得在单一时间所述荧光传感器蛋白中的荧光蛋白和亚铜离子结合蛋白只有一个能够正确折叠。实验结果表明，该传感器蛋白能够在较低亚铜离子浓度时(＜1微摩)就有荧光响应，荧光强度的变化在50％以上，同时较好地克服了锌离子的干扰，对其他常见离子均无响应。

主权项

一种荧光传感器蛋白，其特征在于，在增强绿色荧光蛋白内插入对亚铜离子响应的蛋白域，得到所述荧光传感器蛋白，使得在单一时间所述荧光传感器蛋白中的荧光蛋白和亚铜离子结合蛋白只有一个能够正确折叠；前述增强绿色荧光蛋白内插入的具体位置是在增强绿色荧光蛋白中的第6个和第7个beta片间的环状区域、第145位和第146位的氨基酸残基之间；前述对亚铜离子响应的蛋白域是酵母转录因子Amt1的亚铜离子结合结构域，即Amt1蛋白质的36‑110位的氨基酸序列。