一种利用亲和素结合肽与亲和素结合的原理制备ELISA酶标抗原的方法

摘要

种利用亲和素结合肽与亲和素结合的原理制备ELISA酶标抗原的方法，该酶标抗原是将酶标链霉亲和素(亲和素的一种)与链霉亲和素结合肽(SBP)重组融合抗原混合形成，该方法利用链霉亲和素与生物素能够特异性结合的原理，利用基因工程的方法将模拟生物素结构的链霉亲和素结合肽（SBP）与抗原蛋白分子构建成一个融合蛋白；融合蛋白中的SBP与酶标链霉亲和素通过彼此间的亲和力而结合，形成同时具有抗原活性又有酶活性的新型酶标抗原。这种方法不需要特殊的化学基团来作为偶联的靶位，具有更为广泛的适用性；并且，不直接对抗原分子进行标记，减少了对抗原结构的影响、降低了标记物对抗原抗体反应产生的空间阻碍，从而提高检测的敏感性。

主权项

一种利用亲和素结合肽与亲和素结合的原理制备ELISA酶标抗原的方法，其特征在于：该酶标抗原是根据酶标链霉亲和素的体积摩尔浓度以及SBP重组融合抗原的体积摩尔浓度，将酶标链霉亲和素与SBP重组融合抗原以1:4的摩尔比混合，于4℃偶联反应48小时制得，其中，所述抗原是指猪2型圆环病毒的Cap⊿41蛋白、伪狂犬病毒的gB4蛋白第820－917位氨基酸、伪狂犬病毒的gE蛋白第22－336位氨基酸、猪繁殖与呼吸综合征病毒的N蛋白或猪瘟病毒的NS3蛋白。