改良型腈水合酶

摘要

发明提供催化活性提高了的改良型腈水合酶，并且提供编码该改良型腈水合酶的DNA、包含该DNA的重组载体、包含该重组载体的转化体、从该转化体的培养物中提取的腈水合酶及其制造方法。还提供使用了该培养物或该培养物的处理物的酰胺化合物的制造方法。一种改良型腈水合酶，其特征在于，其为β亚基中包含序列号50(GX1X2X3X4DX5X6R)所示的氨基酸序列的腈水合酶；X4为选自由半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸和苏氨酸所组成的组的氨基酸。

主权项

一种改良型腈水合酶，其具有选自下述(a)～(e)中的至少一种特征：(a)一种改良型腈水合酶，其特征在于，其为β亚基中包含序列号50所示的氨基酸序列的腈水合酶；序列号50：GX1X2X3X4DX5X6RG表示甘氨酸，D表示天冬氨酸，R表示精氨酸，X1、X2、X3、X5、X6分别独立地表示任意的氨基酸残基；X4为选自由半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸和苏氨酸所组成的组的氨基酸；(b)一种改良型腈水合酶，其特征在于，其为β亚基中包含序列号81所示的氨基酸序列的腈水合酶；序列号81：WEX1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16X17X18DW表示色氨酸，E表示谷氨酸，D表示天冬氨酸，X1～X6和X8～X18表示分别独立的任意的氨基酸残基；X7为选自由丙氨酸、缬氨酸、天冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸和甲硫氨酸所组成的组的氨基酸；(c)一种改良型腈水合酶，其特征在于，其为α亚基中包含序列号119所示的氨基酸序列的腈水合酶；序列号119：AX1X2X3X4GX5X6GX7X8A表示丙氨酸，G表示甘氨酸，X1～X7表示分别独立的任意的氨基酸残基；X8为选自由丙氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、脯氨酸、精氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸所组成的组的氨基酸；(d)一种改良型腈水合酶，其特征在于，其为α亚基中包含序列号132所示 的氨基酸序列的腈水合酶；X7被置换为不同于野生型的氨基酸；序列号132：AX1X2X3X4GX5X6GX7QA表示丙氨酸，G表示甘氨酸，Q表示谷氨酰胺，X1～X6表示分别独立的任意的氨基酸残基；(e)一种改良型腈水合酶，其特征在于，其为α亚基中包含序列号136所示的氨基酸序列的腈水合酶；X9被置换为不同于野生型的氨基酸；序列号136：AX1X2X3X4GX5X6GX7QX8X9A表示丙氨酸，G表示甘氨酸，Q表示谷氨酰胺，X1～X8表示分别独立的任意的氨基酸残基。