一种同时测定人血清氧化脂蛋白（a）和氧化低密度脂蛋白的化学发光成像免疫分析方法

摘要

发明公开了一种同时测定人血清氧化脂蛋白（a）和氧化低密度脂蛋白的方法。该分析体系以硅烷化修饰的多组分免疫传感器为固相载体，通过在载体上包被捕获抗体，制成固相抗体；向固相抗体中加入待测样品或标准系列溶液，充分反应后，再加入辣根过氧化物酶标记的抗体，形成夹心免疫复合物；最后，加入化学发光底物鲁米诺-过氧化氢进行反应，通过用高分辨率的电荷耦合器件检测发光强度，从而对人血清的氧化脂蛋白（a）和氧化低密度脂蛋白进行同时定量，并对免疫反应条件、酶结合物稀释度及检测时间等进行了优化，且对该方法的线性范围、精密度、准确性及检测限等指标进行考察。该分析方法具有操作简单、灵敏度高、线性范围窄、稳定性好等优点，具有一定的临床应用价值。

主权项

一种同时检测血清样品中多种氧化脂蛋白含量的化学发光成像免疫分析方法，其特征在于包含以下步骤：步骤1：在硅烷化修饰的载玻片阵列上，包被捕获抗体，温育、洗涤、封闭，制成固相抗体；步骤2：向步骤1制备的固相抗体的微孔中加入相应的标准系列溶液，温育、洗涤；加入相应的辣根过氧化物酶标记的抗体，温育、洗涤；然后加入化学发光底物鲁米诺‑过氧化氢，通过CCD进行化学发光图像的检测；根据标准溶液浓度及对应的化学发光强度值绘制标准曲线；步骤3：向步骤1制备的固相抗体的微孔中加入相应的待测血清样品，温育、洗涤，加入相应的辣根过氧化物酶标记的抗体，温育、洗涤；然后加入化学发光底物鲁米诺‑过氧化氢，通过CCD进行化学发光图像的检测；根据步骤2绘制的标准曲线，计算出样品中不同氧化脂蛋白的浓度。