一种标记活细胞内核酸的方法和试剂盒

摘要

发明公开了一种活细胞内标记活细胞内核酸的方法和试剂盒，该试剂盒主要包括有：能够插入核酸序列中的、带有1，3-二偶极基团或亲偶极基团的核苷类似物；和含有与上述1，3-二偶极基团或亲偶极基团的对应的亲偶极基团或1，3-二偶极基团的生物分子探针；所述1，3-二偶极基团与对应的亲偶极基团可进行“点击”反应。标记时，被含1，3-二偶极基团或亲偶极基团的核苷类似物修饰的核酸可以同对应的活性探针分子通过“点击”反应进行共价连接。所述标记活细胞内核酸的方法和试剂盒使核酸标记后进一步可应用于检测细胞增值，细胞凋亡；标记质粒载体，病毒，小干扰RNA，microRNA以及研究早期发育。

主权项

一种标记活细胞内核酸的试剂盒，其特征是，主要包括有：(A)能够在活细胞内核酸合成的过程中插入核酸序列中的、带有1，3‑二偶极基团或亲偶极基团的核苷类似物；所述核苷类似物为2’‑脱氧‑5‑(1，7辛二炔)‑尿嘧啶核苷、5‑(1，7辛二炔)‑尿嘧啶核苷、5‑乙炔基‑2’‑脱氧胞嘧啶核苷、5‑乙炔基胞嘧啶核苷、2’‑脱氧‑5‑(1，7辛二炔)‑胞嘧啶核苷、5‑(1，7辛二炔)‑胞嘧啶核苷、2’‑脱氧‑8‑乙炔基‑腺嘌呤核苷、8‑乙炔基‑腺嘌呤核苷、2’‑脱氧‑8‑(1，7辛二炔)‑腺嘌呤核苷、8‑(1，7辛二炔)‑腺嘌呤核苷、7‑乙炔基‑7‑氮杂‑2’脱氧‑腺嘌呤核苷、7‑乙炔基‑7‑氮杂‑腺嘌呤核苷、7‑乙炔基‑7‑氮杂‑2’脱氧‑腺嘌呤核苷、7‑乙炔基‑7‑氮杂‑腺嘌呤核苷、7‑(1，7辛二炔)‑7‑氮杂‑2’脱氧‑腺嘌呤核苷、7‑(1，7辛二炔)‑7‑氮杂‑腺嘌呤核苷、2’‑脱氧‑8‑乙炔基‑鸟嘌呤核苷、8‑乙炔基‑鸟嘌呤核苷、2’‑脱氧‑8‑(1，7辛二炔)‑鸟嘌呤核苷、8‑(1，7辛二炔)‑鸟嘌呤核苷、7‑乙炔基‑7‑氮杂‑2’脱氧‑鸟嘌呤核苷、7‑乙炔基‑7‑氮杂‑鸟嘌呤核苷、7‑乙炔基‑7‑氮杂‑2’脱氧‑鸟嘌呤核苷、7‑乙炔基‑7‑氮杂‑鸟嘌呤核苷、7‑(1，7辛二炔)‑7‑氮杂‑2’脱氧‑鸟嘌呤核苷、7‑(1，7辛二炔)‑7‑氮杂‑鸟嘌呤核苷、5‑叠氮基‑2'‑脱氧尿嘧啶核苷、5‑乙炔基尿嘧啶核苷、5‑叠氮基‑2’‑脱氧胞嘧啶核苷、5‑乙炔基胞嘧啶核苷、2’脱氧‑8‑叠氮基‑腺嘌呤核苷、8‑叠氮基‑腺嘌呤核苷、2’脱氧‑8‑叠氮基‑鸟嘌呤核苷、8‑叠氮基‑鸟嘌呤核苷；(B)含有与上述1，3‑二偶极基团或亲偶极基团的对应的亲偶极基团或1，3‑二偶极基团的生物分子探针；核苷类似物与生物分子探针通过所述1，3‑二偶极基团能与对应的亲偶极基团进行“点击”反应；还包括有催化剂，所述催化剂为含亚铜离子化合物。