六味地黄汤总提取物组合物在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用

摘要

味地黄汤总提取物组合物在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用。六味地黄汤总提取物组合物，原料药由熟地黄、制山茱萸、山药、泽泻、牡丹皮和茯苓按照8:4:4:3:3:3的重量比组成，特征是组合物中包括有：六味地黄汤总提取物挥发油β-环糊精包合物组分；六味地黄汤总提取物多糖组分；六味地黄汤总提取物糖苷类组分，以及六味地黄汤总提取物脂溶性组分。本发明克服了现有技术忽略六味地黄汤总提取物脂溶性有效成分的不足，通过提取工艺，得到六味地黄汤总提取物的更完备的组分构成，并使得采用这种组合物治疗治疗糖尿病肾病成为可能。本发明基于六味地黄汤的治疗新适应症和新靶点，由于抑制NADPH氧化酶，以治疗糖尿病肾病。

主权项

1.一种六味地黄汤总提取物组合物在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用，其特征在于，所述的六味地黄汤总提取物组合物，其原料药由熟地黄、山茱萸、山药、泽泻、牡丹皮和茯苓按照10.4～7.6：5.2～2.8：5.2～2.8：3.9～2.1：3.9～2.1：3.9～2.1的重量比组成，所述的组合物中包括有：六味地黄汤总提取物挥发油β-环糊精包合物组分，六味地黄汤总提取物多糖组分，六味地黄汤总提取物糖苷类组分，以及六味地黄汤总提取物脂溶性组分；所述的组合物具有以下特征：⑴.六味地黄汤总提取物组合物的红外光谱的特征峰：(cm^-1)：3396、2926、2855、1711、1615、1516、1453、1376、1203、1163、1078、1030、765、714、573；或者，六味地黄汤总提取物组合物的二阶导数红外光谱的特征峰：(600～1800cm^-1)：1740、1710、1687、1606、1515、1467、1377、1316、1276、1204、1154、1077、1027、794、768、742、715；⑵.六味地黄汤提取物的多糖组分的红外光谱的特征峰：(cm^-1)：3400、2930、1718、1618、1417、1372、1238、1152、1079、1024、868、766、604、575、527；或者，六味地黄汤提取物的多糖组分的二阶导数红外光谱的特征峰：(600～1800cm^-1)：1731、1609、1561、1522、1506、1471、、1372、1230、1205、1153、1125、1106、1079、1056、1023、995、963、913、866、835、819、799、759、704、658、643、616、604；⑶.六味地黄汤提取物中糖苷类组分的红外图谱的特征峰：(cm^-1)：3398、2934、1709、1610、1533、1516、1450、1383、1278、1205、1073、1038、837、765、715、627；或者，六味地黄汤提取物中糖苷类组分的二阶导数红外光谱的特征峰：(600～1800cm^-1)：1747、1715、1653、1631、1603、1534、1515、1490、1468、1451、1418、1396、1384、1349、1316、1280、1202、1176、1119、1098、1072、1038、1005、940、918、897、872、853、821、767、741、715；⑷.六味地黄汤提取物脂溶性组分的红外图谱的特征峰：(cm^-1)：3391、2928、1729、1668、1408、1385、1349、1226、1146、1075、920、868、817、777、629、590、422；或者，六味地黄汤提取物脂溶性组分的二阶导数红外光谱的特征峰：(600～1800cm^-1)：1736、1667、1609、1560、1523、1498、1457、1419、1384、1341、1315、1195、1150、1105、1079、1054、1026、977、962、917、891、865、817、799、779、700、673、661、631；所述的组合物是指通过以下方法制备得到的组合物：（1）水煎液的制备：将由熟地黄、制山茱萸、山药、泽泻、牡丹皮和茯苓按照8:4:4:3:3:3处方投料，水煎煮，同时回收挥发油，合并水煎液，水煎液浓缩至清膏，药渣备用；（2）挥发油β-环糊精包合物组分的制备：采用β-环糊精饱和水溶液法包合六味地黄汤总提取物的挥发油，将六味地黄汤总提取物的挥发油缓缓滴入β-环糊精饱和水溶液中并不断搅拌，冷藏静置后抽滤，干燥，即得挥发油β-环糊精包合物组分；（3）水煎液的乙醇沉淀：将步骤（1）中的清膏中加入乙醇并不断搅拌至乙醇重量比浓度为70%，冷藏静置，分离得到上清液和沉淀；（4）多糖组分的制备：将步骤（3）中的沉淀与水配成混悬液，离心，除去不溶物，采用截留分子量为5万的超滤膜过滤，弃去膜上液，除去相对分子量大于5万的大分子物质，膜下液再用截留分子量值为1万的超滤膜过滤，除去相对分子量低于1万的小分子物质，收集膜上液，浓缩得到相对分子量1万～5万分子量的物质，喷雾干燥得到多糖组分；（5）糖苷类组分的制备：将步骤（3）中的上清液经大孔树脂柱层析，依次以水、不同浓度的乙醇的梯度洗脱，分别收集流分，合并乙醇部分浓缩至无醇味，喷雾干燥得到糖苷类组分；（6）脂溶性组分的制备：将步骤（1）中的药渣干燥后，加入乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至无醇味后，干燥得到脂溶性组分；（7）六味地黄汤总提取物的制备：步骤（2）中的挥发油β-环糊精包合物组分、步骤（5）中糖苷类组分及步骤（6）中脂溶性组分混合，按适当比例与步骤（4）中多糖组分混合制粒，干燥，压片或灌封胶囊，即得六味地黄汤总提取物组合物；步骤（1）中，所述的水煎液是水煎煮2～3次；所述的水煎液浓缩至清膏，是浓缩至清膏50℃的相对密度：1.10～1.25；步骤（2）中，所述的冷藏，是指4℃冷藏静置12～48小时；所述的干燥，是在30～60℃干燥；步骤（3）中，水煎液的乙醇沉淀：所述的冷藏，是指4℃冷藏静置12～48小时；步骤（5）中，所述的梯度洗脱中的固定相为制药上可接受的大孔树脂；梯度洗脱是依次以水、重量比浓度20%的乙醇洗脱，弃去洗脱液；用40%～75%的乙醇梯度洗脱，收集流分，合并洗脱液；步骤（6）中，所述的乙醇回流提取，是指乙醇回流提取2次，每次1小时，合并滤液，再回收乙醇，浓缩。