发明名称 |
对亚型禽流感病毒进行检测过程中RNA样品的收集 |
摘要 |
本发明公开了对亚型禽流感病毒进行检测过程中RNA样品的收集,首先对样品进行酶切鉴定,即在适宜的温水中进行消化,至少5小时,然后用百分之二点三的琼脂糖凝胶电泳进行测试,检验其结果;第二步是对其进行序列测定,即对于回收的阳性产物,以此作为模版继续拧PCR扩增,然后连接、转化,得到阳性克隆物,对其进行测序;去除PCR反应中的反应物,加入适量的酶混合物,二者重量比例为5:1;充分混合后烤箱中烘干;温浴;悬浮沉淀物;吸取沉淀物即可;在进行悬浮之前,可以进行低速离心,最多三分钟;所述酶切鉴定和序列鉴定两个步骤之间,时间间隔不能超过12小时。本发明的有益效果是,实验的特异性和灵敏性比较高,能够配合阐述核酸序列结构,操作相对简单,对条件要求不高。 |
申请公布号 |
CN103614492A |
申请公布日期 |
2014.03.05 |
申请号 |
CN201310544096.3 |
申请日期 |
2013.11.06 |
申请人 |
李刚 |
发明人 |
李刚 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
对亚型禽流感病毒进行检测过程中RNA样品的收集,其特征在于,首先对样品进行酶切鉴定,即在适宜的温水中进行消化,至少5小时,然后用百分之二点三的琼脂糖凝胶电泳进行测试,检验其结果;第二步是对其进行序列测定,即对于回收的阳性产物,以此作为模版继续拧PCR扩增,然后连接、转化,得到阳性克隆物,对其进行测序;去除PCR反应中的反应物,加入适量的酶混合物,二者重量比例为5:1;充分混合后烤箱中烘干;温浴;悬浮沉淀物;吸取沉淀物即可。 |
地址 |
116000 辽宁省大连市西岗区凤鸣街44-5 |