一种对含有GFP基因的表达载体进行构建的方法

摘要

本发明公开了一种对含有GFP基因的表达载体进行构建的方法。步骤如下：首先，酶切质粒，具体为单酶切质粒，在35-36摄氏度的恒温下进行水浴，时间至少为2小时，最多5小时；用百分比不超过百分之一点五的琼脂糖凝胶电泳进行检测，胶回收线性化比较大的片对，然后对其进行末端补平；末端补平：即将回收的部分混合，然后用离心机进行甩干离心，65摄氏度的条件下进行温育，时间不少于十分钟；用无水乙醇，在零下二十度的环境下进行预冷后，放置至少30分钟；告诉离心；弃掉上清；使用TE溶解上述步骤产生的沉淀；单酶切质粒，点用检测并胶回收片段，即构建所需质粒；所述无水乙醇，需要为补平后体积的3-4倍，之前需要放置在室温下进行静置。本发明的有益效果是，成本较低、重复性好，与预期相符，说明质粒构建的合理性和成果性。

主权项

一种对含有GFP基因的表达载体进行构建的方法，其特征在于，步骤如下：首先，酶切质粒，具体为单酶切质粒，在35‑36摄氏度的恒温下进行水浴，时间至少为2小时，最多5小时；用百分比不超过百分之一点五的琼脂糖凝胶电泳进行检测，胶回收线性化比较大的片对，然后对其进行末端补平；末端补平：即将回收的部分混合，然后用离心机进行甩干离心，65摄氏度的条件下进行温育，时间不少于十分钟；用无水乙醇，在零下二十度的环境下进行预冷后，放置至少30分钟；告诉离心；弃掉上清；使用TE溶解上述步骤产生的沉淀；单酶切质粒，点用检测并胶回收片段，即构建所需质粒。