发明名称 一种用碱裂解大量提取质粒的方法
摘要 本发明公开了一种用碱裂解大量提取质粒的方法。步骤如下:首先准备适当的衣藻;将其菌液转移到已经过高温灭菌的离心管中;弃上清;菌体中加入预热的溶液,涡旋振荡,摇晃均匀;静置5-8分钟;用上部将其中的沉淀过滤到新的离心管中;加入2-2.5倍提及的一乙醇胺;混合均匀后再次静置;了乙醇洗涤,沉淀;室温晾干即可;所述衣藻,要求已至其生长中后期,使用前24小时,需要将其置于离心管中,高速离心运转,取其上清,涂膜至琼脂平板,光照23摄氏度的条件下,持续48小时;其中晾干后所得质粒需要加入异丙醇,质量分数为65%。本发明的有益效果是:操作简单,成本较低,实验条件要求不高,可以用于反复性操作,获得预期效果。
申请公布号 CN103614362A 申请公布日期 2014.03.05
申请号 CN201310536448.0 申请日期 2013.11.04
申请人 辛竹 发明人 辛竹
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C12R1/89(2006.01)N 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种用碱裂解大量提取质粒的方法,其特征在于,步骤如下:首先准备适当的衣藻;将其菌液转移到已经过高温灭菌的离心管中;弃上清;菌体中加入预热的溶液,涡旋振荡,摇晃均匀;静置5‑8分钟;用上部将其中的沉淀过滤到新的离心管中;加入2‑2.5倍提及的一乙醇胺;混合均匀后再次静置;了乙醇洗涤,沉淀;室温晾干即可。
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