鸡新城疫血凝抑制试验用阳性血清国家标准品及制备方法

摘要

本发明涉及一种鸡新城疫血凝抑制试验用阳性血清国家标准品及其制备方法。本发明所涉及的鸡新城疫血凝抑制试验用阳性血清国家标准品是利用鸡新城疫La Sota株病毒(NDV)和灭活疫苗免疫SPF鸡制备高免血清作为候选物，通过候选物检验、标准品制备和检验、分装、冻干等工艺过程，并以NIBSC获得的鸡新城疫血凝抑制试验用阳性血清国际标准品为参比进行红细胞凝集抑制试验测定其效价，经过均一性检验、稳定性试验、协作标定，数据统计，保证效价定值准确而制备出鸡新城疫血凝抑制试验用阳性血清国家标准品。本发明的方法按照标准品制备程序使标准品制备更加科学、严谨、完善。

主权项

一种鸡新城疫血凝抑制试验用阳性血清国家标准品，其特征在于本发明所涉及的鸡新城疫血凝抑制试验用阳性血清国家标准品其红细胞凝集抑制效价为1:160，根据国际标准，计算其国际单位含量为320IU/mL，其制备方法为：（1）是通过鸡LaSota株新城疫病毒和新城疫灭活疫苗免疫SPF鸡制备高免血清，当抗体水体满足要求时采用无菌心脏采血法取血、分离血清、加入抗生素，备用；（2）阳性血清国家标准品候选物的选择和制备以红细胞凝集抑制试验方法分别测定被检阳性血清的血凝抑制效价，若连续重复3次以上试验，试验结果完全一致，且被检阳性血清的血凝抑制效价达1:5120以上，则该阳性血清即可作为鸡新城疫阳性血清国家标准品的候选物；以鸡新城疫阴性血清将鸡新城疫阳性血清国家标准品的候选物稀释成与鸡新城疫血凝抑制试验用阳性血清国际标准品的效价一致；候选物经0.4μm和0.22μm无菌滤膜过滤、精确分装至1mL灭菌长安瓿，分装精度为±0.01mL，按常规方法冻干后抽真空、熔封；（3）标准品的检验1）物理性状、无菌检验、真空度测定、剩余水分测定按《中华人民共和国兽用生物制品规程》和《中华人民共和国兽药典》规定方法进行检验；2）效价测定随机抽取规定数量的样品用阳性血清国际标准品为参比进行红细胞凝集抑制试验测定其效价；3）均一性检验随机抽取规定数量的样品，以鸡新城疫阳性血清国际标准品作参比进行红细胞凝集抑制试验测定其效价，试验结果应一致；4）稳定性试验检查在37℃下，样品放置的时间，并以此数据作为依据，为下一批稳定性试验作基础；5）协作标定定值选择3个以上具有对鸡新城疫红细胞凝集抑制试验富有经验的实验室，每个实验室用3个样品，每个样品重复2次，同时用国际标准品做参比，各协作标定单位按照协作标定方案的要求进行标定；并将实验结果交给组织单位进行整理后确定协作标定数值；通过协作标定结果，计算出1mL鸡新城疫血凝抑制试验用阳性血清国家标准品的国际单位含量，以此作为国家标准品的确定值。