一种检测RNA病毒hMPV的方法、试剂盒及应用

摘要

本发明涉及一种检测RNA病毒hMPV的方法及试剂盒，具体讲涉及一种利用逆转录等温扩增技术检测RNA病毒hMPV的方法及试剂盒。该检测方法为：根据人偏肺病毒的N基因的相对保守区，分别设计了六条引物，包括两条外引物F3、B3和两条内引物FIP、BIP，两条环结合引物LF、LB；处理待测标本，提取样本的RNA后，进行RT-LAMP反应；然后通过电泳检测或肉眼观察，最终得到结果。本发明建立了hMPVN基因的RT-LAMP检测方法，灵敏度可以达到10个拷贝，灵敏度远高于传统PCR方法，并且该方法还具有良好的特异性，不与RSV，HBoV和H1N1的核酸发生交叉反应。

主权项

一种检测RNA病毒hMPV的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中包括病毒RNA提取试剂盒、RT‑LAMP的反应体系、阴性质控品和阳性质控品的定量参考品，所述RT‑LAMP的反应体系中包括两条外引物F3、B3，两条内引物FIP、BIP和两条环结合引物LF、LB；所述的引物的核苷酸序列为：外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；内引物FIP(F1c+F2)的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；内引物BIP(B1c+B2)的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；环引物LF的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；环引物LB的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。