发明名称 一种能够有效筛选shRNA片段的方法
摘要 本发明公开了一种能够有效筛选shRNA片段的方法,其特征在于,步骤如下:首先选择事情设计好的目标shRNA,将其连接与目标载体中;将需要重组的质粒载体转染至shRNA中;组件中采用多重比较法进行比较,当其转染上细菌后,选择最有效的基因沉默;再与其他实验组进行比对,对于最有效的干扰质粒,即为需要选择的shRNA片段。重组蛋白的时候,滴入含有安卡青霉素的溶液,浓度百分比至少为15%;表达绿色荧光蛋白的重组质粒24小时内可以在荧光显微镜下进行筛选。本发明的有益效果是,可以有效鉴定PVCR,同时效果明显,表达清楚、稳定,为下一步能够成功建立模型奠定坚实基础。
申请公布号 CN103614461A 申请公布日期 2014.03.05
申请号 CN201310531291.2 申请日期 2013.11.01
申请人 刘军 发明人 刘军
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种能够有效筛选shRNA片段的方法,其特征在于,步骤如下:首先选择事情设计好的目标shRNA,将其连接与目标载体中;将需要重组的质粒载体转染至sh RNA中;组件中采用多重比较法进行比较,当其转染上细菌后,选择最有效的基因沉默;再与其他实验组进行比对,对于最有效的干扰质粒,即为需要选择的sh RNA片段。
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