一种用胶原微载体在反应器中扩大培养动物细胞的方法

摘要

本发明公开了一种用胶原微载体在反应器中扩大培养动物细胞的方法，是将微载体处理后，以胰蛋白酶将微载体和细胞进行消化，再将细胞逐步进行扩大培养。本发明的有益效果为：本发明提供的一种用胶原微载体在反应器中扩大培养动物细胞的方法，其采用反应器和国产的胶原微载体扩大培养细胞的工艺，培养规模从方瓶→（0.25-2L悬浮培养瓶）→（5-7.5L反应器）→（50-120L反应器）→250L反应器→线性放大,从根本上解决了微载体培养细胞规模线性放大的技术工艺，该工艺操作简单，将对现有疫苗工艺进行技术升级的同时，降低了疫苗的生产成本，提高产品产量和质量，在实际生产中具有应用前景。

主权项

一种用胶原微载体在反应器中扩大培养动物细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）微载体处理：将微载体以含有吐温‑80的纯化水浸泡，再以PBS平衡盐溶液清洗后，转入至反应器或悬浮培养瓶中，高压灭菌，冷却静置，以含新生小牛血清的细胞培养液清洗后加入相同体积的含新生小牛血清的细胞培养液备用；2）胰蛋白酶消化微载体和细胞：消化1g长满细胞的胶原微载体用质量百分比浓度为0.25%的胰蛋白酶25‑50ml的比例使用胰蛋白酶；3）细胞扩大培养：    从方瓶→0.25‑2L悬浮培养瓶→5‑7.5L反应器→50‑120L反应器→250L反应器→线性放大。