水稻工程保持系的培育方法及其在水稻普通核不育系繁殖中的应用

摘要

本发明公开了一种水稻工程保持系的培育并将培育的工程保持系应用于水稻普通核不育系繁殖的方法，包括以下步骤：先采用图位克隆的方法定位并克隆水稻普通核不育系的不育基因s和不育系来源亲本的可育基因S；将颜色标记基因C与可育基因S连接到同一个双元表达载体上，使二者在导入植物后能连锁遗传、共分离；采用转基因方法将表达载体转入普通核不育系中，得到育性恢复株系；再将其与普通核不育系回交，获得工程保持系。本发明培育的工程保持系与水稻普通核不育系杂交，在杂交后代中可同时获得工程保持系种子和水稻普通核不育系种子。本发明可机械化、规模化应用于水稻普通核不育系的繁殖制种，且能够大大简化普通核不育系的繁殖过程。

主权项

一种水稻工程保持系的培育方法，包括以下步骤：（1）准备基因型为ss的水稻普通核不育系，通过采用图位克隆的方法定位并克隆所述水稻普通核不育系的不育基因s；（2）根据上述不育基因的序列设计引物，克隆出上述水稻普通核不育系来源亲本的可育基因S，该可育基因S能够恢复所述水稻普通核不育系育性；可育基因S以其自身启动子驱动，启动子为编码区的前2kb的序列；（3）将颜色标记基因C与上述的可育基因S连接到同一个双元表达载体上，使颜色标记基因C与可育基因S在导入植物后能连锁遗传，且颜色标记基因C与可育基因S中间没有间隔碱基，连锁为100%，两者共分离，得到双元表达载体pSC；（4）采用现有的转基因方法将所述双元表达载体pSC转入所述的水稻普通核不育系中，最后得到水稻普通核不育系的育性恢复株系SCSC；（5）将所述育性恢复株系的纯合株系与普通核不育系ss回交，获得基因型为sSC单拷贝插入的株系，即为工程保持系；所述水稻普通核不育系的不育性状是由单基因控制的隐性性状，所述可育基因S对不育基因s为显性，且不育性状不受外界环境条件影响。