乳品真蛋白的SDS-PAGE检测方法及其鉴定图谱库

摘要

本发明公开乳品真蛋白的SDS-PAGE检测方法及其鉴定图谱库。所述检测方法是将预处理待检样品后，以不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测，并以UVP凝胶成像仪摄像结合Labwork软件进行分析，将泳道的蛋白质斑点密度与样品中真蛋白浓度关联，并对照标准曲线从而计算蛋白含量本发明所述的乳品真蛋白的SDS-PAGE检测方法可以快速灵敏便捷地检测处乳品中真蛋白的组成及其含量，且过程中处理所得样品可直接用于乳品中总蛋白的含量测定。真正实现一次测量得到目标结果。同时采用上述方法建立了乳品真蛋白的SDS-PAGE鉴定图谱库。可用于待测乳品的SDS-PAGE比对，以便直接进行判定与评价。具备非常好的应用前景。

主权项

乳品真蛋白的SDS‑PAGE检测方法，包括如下步骤：①预处理待检样品，制备测试样品，所述待检样品包括待检乳粉样品、待检乳清粉样品和待检含乳饮料样品；②向步骤1制备的测试样品中按照1mg：20μL的比例加入浓度为50mmol/L的Tris‑HCL缓冲液，振动混合5min，100℃水浴5min，10000r/min离心5min，以上清液进行后续检测；所述的Tris‑HCL缓冲液的pH值6.8，其还含0.05kg/L SDS，0.1kg/Lβ‑巯基乙醇，体积百分含量为20%的甘油以及0.002kg/L溴酚兰；③采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳进行样品分析，上样量为30μL，25mA恒流电泳5h；然后取出胶片并用2.5%的考马斯亮兰染色4h，继而使用甲醇‑冰醋酸按照体积比30:10混合而成的脱色液脱色至透明；④脱色后的电泳胶片置于UVP凝胶成像仪摄像，采用Labwork软件，分析记录每泳道的蛋白质斑点密度，对照标准曲线I计算蛋白含量；所述标准曲线I由标准蛋白的含量对以相同方法获得的蛋白斑点密度作图所得。