一种靶向治疗肝癌的复合磁性纳米粒及制备方法

摘要

本发明是一种靶向治疗肝癌的复合磁性纳米粒及制备方法，该方法是分别制备重组真核表达质粒p[HRE]AFP-p53和聚乙烯亚胺修饰的四氧化三铁纳米磁粒，再将聚乙烯亚胺修饰的纳米磁粒与质粒p[HRE]AFP-p53按照质量比为2：1至16：1混匀，孵育30分钟，即获得p[HRE]AFP-p53/聚乙烯亚胺四氧化三铁磁性纳米粒复合物。本发明制得的复合物用于肝癌靶向基因治疗与磁流体热疗的联合，在体内外治疗试验中，均获得了具有肝癌特异性的治疗效果。

主权项

一种靶向治疗肝癌的复合磁性纳米粒的制备方法，其特征在于，该方法包括下述步骤：（1）质粒p[HRE]AFP‑p53的制备：将甲胎蛋白启动子序列插入质粒pCDNA3.1 的MluI‑HindIII质粒限制性内切酶位点，得到质粒pCDNA3.1‑AFP；将5个连续的乏氧反应序列元件插入质粒pCDNA3.1‑AFP的质粒限制性内切酶M1uI位点，得到质粒pCDNA3.1‑HRE‑AFP；将野生型p53片段亚克隆至质粒pCDNA3.1‑HRE‑AFP的质粒限制性内切酶EcoRⅠ‑XhoⅠ位点，得到质粒p[HRE]AFP‑p53；（2）制备复合磁性纳米粒：将质粒p[HRE]AFP‑p53和聚乙烯亚胺修饰的四氧化三铁磁性纳米粒分别用无血清培养基稀释，然后将两者按照磁性纳米粒与p[HRE]AFP‑p53质量比为2：1至16：1混和均匀，孵育后即获得靶向治疗肝癌的复合磁性纳米粒。